低溫分級(jí)法

利用不同的脂肪酸在過(guò)冷有機(jī)溶劑中的溶解度差異來(lái)分離濃縮DHA。將魚油溶解在1~10倍的無(wú)水丙酮中，并冷卻至-25℃以下?；旌弦旱南聦蛹葱纬珊写罅匡柡椭舅峒暗投炔伙柡椭舅峤Y(jié)晶，而上層含有大量高度不飽和脂肪酸的丙酮溶液。將混合液過(guò)濾，濾液在真空下蒸餾除去丙酮即可得到DHA含量較高的魚油制劑。為了提高分離效果可在無(wú)水丙酮中添加少量親水性溶劑如水或醇類。

溶劑提取法

利用不同脂肪酸的金屬鹽、在某種有機(jī)溶劑中的溶解度差異來(lái)分離濃縮DHA。將乙醇、魚油及NaOH按一定比例混合，然后加熱使魚油皂化。皂化后的混合液經(jīng)壓濾分別得到皂液及皂粒。皂液在攪拌下加入H2SO4至PH為1~2。分離上層粗脂肪酸乙醇混合液，加熱回收乙醇，并反復(fù)水洗祖脂肪酸至中性，即得DHA含量較高的精制魚油。

1、尿素包合

脂肪酸與尿素的結(jié)合能力取決于其不飽和程度。脂肪酸的不飽和度越高、則與尿素的結(jié)合能力越弱。依此原理即可將飽和脂肪酸、低度不飽和脂肪酸與高度不飽和脂肪酸分離開來(lái)。在魚油中加人尿素甲醇（或乙醇）后加熱混合、過(guò)濾并用適當(dāng)溶劑萃取濾液，即得萃取液脫去溶劑、真空干燥后即得到DHA含量較高的精制魚油。

尿素包合法是一種比較簡(jiǎn)便有效的分離方法，但在實(shí)際生產(chǎn)中應(yīng)用時(shí)，存在溶劑損耗大、排水和因尿素添加物而引起的廢物處理等問題。為此，Kazuhiko開發(fā)了一種尿素包合與連續(xù)精餾相結(jié)合的分離方法，既解決了上述問題，又避免了魚油因與空氣接觸而氧化，還可以提高分離效果，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

2、超臨界流體萃取

即將含有DHA的魚油溶解于超臨界狀態(tài)的CO2中，通過(guò)改變溫度和壓力，達(dá)到分離DHA的目的。此法能分離出高純度的DHA，但對(duì)碳數(shù)相同而雙鍵數(shù)不同的脂肪酸的分離效果較差。為此，可利用銀離子能與雙鍵絡(luò)合形成可逆的絡(luò)合物的特性，在超臨界CO2萃取裝置中增加1支AgNO3－硅酸色譜柱，達(dá)到將碳數(shù)相同而雙鍵數(shù)不同的脂肪酸分離的目的。

3、己烷溶劑液液萃取

應(yīng)用己烷溶劑對(duì)各種微生物發(fā)酵液的液液萃?。▉喤R界生物技術(shù)），可以使DHA毛油得到徹底的利用，是國(guó)內(nèi)應(yīng)用廣泛的大規(guī)模化加工方法

上述分離方法同樣適用于通過(guò)選擇和培養(yǎng)某些真菌和海藻來(lái)提取DHA的途徑