上海谷研實業(yè)有限公司
店齡5年 · 企業(yè)認證 · 上海市松江區(qū)
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埃希氏菌通用LAMP試劑盒50次
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特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:埃希氏菌通用LAMP試劑盒50次
英文名稱:Universal lamp kit for Escherichia coli
產(chǎn)品貨號:GOY6837
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
技術保護點:
一種用于檢測螺旋體的LAMP引物組,其特征在于,包括一對外引物和一對內引物,其中,所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物,所述內引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內引物和反向內引物。
使用方法:
一、埃希氏菌通用LAMP試劑盒50次稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
下列是埃希氏菌通用LAMP試劑盒50次的相關熱銷產(chǎn)品:
異辛胺 99%跨膜蛋白27(TMEM27)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
2-氟醇 95%肝細胞生長因子(HGF)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
1-羥基-苯并-三氮唑(無水) 99%煙堿型膽堿受體α1(CHRNα1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
DL-高半胱氨 95%Toll樣受體3(TLR3)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
DL-高胱氨 98%絲氨/蘇氨激酶39(STK39)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
DL-高半胱氨內脂鹽鹽 98%天冬酰胺合成酶(ASNS)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
1-羥基苯駢三氮唑一水物 97%鈣粘蛋白EGF LAG七經(jīng)G-型受體2(CELSR2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
2-羥基吡啶 97%彈性蛋白微原纖維界面因子2(EMILIN2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
異胺 99%絡絲蛋白(RL)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
對氧基苯 98%成纖維細胞生長因子18(FGF18)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
3-氧基-1-丙醇 98%成纖維細胞生長因子18(FGF18)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
環(huán)丙酯 98%成纖維細胞生長因子11(FGF11)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
4-基兒茶酚 96%成纖維細胞生長因子12(FGF12)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
S-基異脲鹽 98%成纖維細胞生長因子13(FGF13)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
5-氧基-2-巰基苯并咪唑 98%白介素34(IL34)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
埃希氏菌通用LAMP試劑盒50次 花生四15脂合酶2抗體 LCN2 ELISA Kit 脂質運載蛋白2(LCN2)ELISA試盒
嘧菌酯;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
載脂蛋白C4抗體 LXA4 ELISA Kit 脂素A4(LXA4)ELISA試盒
克菌丹;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
原始廣泛存在蛋白1抗體 ADIPOR2 ELISA Kit 脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)ELISA試盒
生物;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
受體銜接蛋白抗體 LTA ELISA Kit 脂壁(LTA)ELISA試盒
四螨嗪;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
錨蛋白重復結構域蛋白37抗體 ADIPOR1 ELISA Kit 脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA試盒
抑菌靈;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
α1,4-半乳糖基轉移酶1 ADT ELISA Kit 脂聯(lián)素(ADT)ELISA試盒
阿維菌素;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.1g
緊張素Ⅱ受體相關蛋白抗體 ADP ELISA Kit 脂聯(lián)素(ADP)ELISA試盒
對羥基-對照品;有報告 訂購|咨詢 規(guī)格: 50mg
膜粘連蛋白2受體抗體 aFABP ELISA Kit 脂肪細胞脂肪結合蛋白(aFABP)ELISA試盒
木糖;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.25g