使用方法:

一、犬附紅細(xì)胞體（犬嗜血支原體）LAMP試劑盒50次稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

產(chǎn)品名稱：犬附紅細(xì)胞體（犬嗜血支原體）LAMP試劑盒50次

英文名稱：Lamp kit for Eperythrozoon canis

產(chǎn)品貨號(hào)：GOY6808

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

PCR反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。

設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 

下列是犬附紅細(xì)胞體（犬嗜血支原體）LAMP試劑盒50次的相關(guān)熱銷(xiāo)產(chǎn)品：
3-炔-1-醇 97%CopineⅠ蛋白(CPNE1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

1,4-雙(三基硅烷基)-1,3-二炔 98%N-酰轉(zhuǎn)移酶8(NAT8)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

雙(三苯基膦)氯化鎳(Ⅱ) 98%N-酰轉(zhuǎn)移酶10(NAT10)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

雙(頻哪醇合)二 98%Battenin蛋白(BTS)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

叔基二基硅烷基三氟烷磺酯 98%肌氨脫酶(SARDH)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

3-溴吡啶 98%小腦肽4(CBLN4)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

苯并呋喃 99%精脒/精胺N1-酰基轉(zhuǎn)移酶1(SAT1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

芐基氯基醚 60%精脒/精胺N1-?；D(zhuǎn)移酶2(SAT2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

3-溴-5-酰基吡啶 97%多胺酶(PAOX)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

2-溴-5-硝基吡啶 98%甘胺-N-基轉(zhuǎn)移酶(GNMT)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

3-溴-5-羥基吡啶 97%肌醇單酶2(IMPA2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

3-溴-5-氯吡啶 97%肌醇單酶1(IMPA1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

5-溴-2-氰基吡啶 97%肌原調(diào)節(jié)蛋白1(MYOZ1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

2-溴-3-吡啶醛 97%筑絲蛋白3(TEKT3)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

5-溴-1-烯 95%筑絲蛋白1(TEKT1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
犬附紅細(xì)胞體（犬嗜血支原體）LAMP試劑盒50次Rhizoma menispermi北豆根探針?lè)≒CR鑒定試盒   負(fù)20度 一年2-4周 低溫

Radix glehniae北沙參探針?lè)≒CR鑒定試盒   負(fù)20度 一年2-4周 低溫

Fructus piperis longi蓽茇探針?lè)≒CR鑒定試盒     負(fù)20度 一年2-4周 低溫

旋復(fù)花內(nèi)酯KG-1(細(xì)胞) 

雪膽素KP-N-NS(上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞()) 

雪膽素L1210(細(xì)胞) 

雪松L6(大成肌細(xì)胞 ) 

血根50L6565(小L6565克隆細(xì)胞系) 

血竭素430663     5mlL929(成纖維細(xì)胞)  
技術(shù)保護(hù)點(diǎn):

一種用于檢測(cè)螺旋體的LAMP引物組，其特征在于，包括一對(duì)外引物和一對(duì)內(nèi)引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述內(nèi)引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內(nèi)引物和反向內(nèi)引物。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！