使用方法:

一、短螺旋體通用LAMP試劑盒50次稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。

1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。

2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。

3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。

二、樣品 DNA 的制備

7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。

三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）

9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

產(chǎn)品名稱：短螺旋體通用LAMP試劑盒50次

英文名稱：Lamp kit for short spirochete

產(chǎn)品貨號(hào)：GOY6550

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 

引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。

設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。 

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。 

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。 

下列是短螺旋體通用LAMP試劑盒50次的相關(guān)熱銷產(chǎn)品：
四鋰 99.99%白介素5(IL5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

溴化鋰 99.9% metals basis白介素5(IL5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

鈷胺 98%白介素5(IL5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

去氧膽 98%白介素5(IL5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

去氧膽 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99% 白介素5(IL5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

去膽 98.5%膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

脫氧膽鈉 98%膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

膽鈉 98%膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

膽鈉 for cell culture，≥99.0%載脂蛋白C1(APOC1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

N,N-二仲基對(duì)苯二胺 96%載脂蛋白C1(APOC1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

壬基酚聚氧烯醚 Type NP-9載脂蛋白C1(APOC1)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

DL-丙氨 99%線粒體肌激酶1A(CKMT1A)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

N-酰-DL-色氨 98%線粒體肌激酶1A(CKMT1A)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

N-酰-3，5-二碘-L-酪氨 98%線粒體肌激酶1A(CKMT1A)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

D-丙氨酯鹽鹽 98%轉(zhuǎn)鐵蛋白受體2(TFR2)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
短螺旋體通用LAMP試劑盒50次細(xì)胞，LN229細(xì)胞HLA-DQA1細(xì)胞株96T進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)原裝、分裝進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)100mgCAS號(hào)：水楊苷 96TELISA Kit for Lin-28 Homolog A (LIN28A)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)4℃，避光30462-34-196T載脂蛋白A5(apo-A5)CLIA試盒HPLC≥93%游離狀腺素檢測(cè)試盒20mgHLA-DQA159122-55-3高端化學(xué)試接觸蛋白6(CNTN6)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)原裝、分裝進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)3 stripsCAS號(hào)：斯皮諾素 96TELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)常溫，避光58-55-996T解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)CLIA試盒HPLC≥98%游離睪酮檢測(cè)試盒50mgHLA-DPA159122-55-3高端化學(xué)試接觸蛋白5(CNTN5)檢測(cè)試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)30462-34-196T載脂蛋白A5(apo-A5)CLIA試盒 
技術(shù)保護(hù)點(diǎn):

一種用于檢測(cè)螺旋體的LAMP引物組，其特征在于，包括一對(duì)外引物和一對(duì)內(nèi)引物，其中，所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物，所述內(nèi)引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內(nèi)引物和反向內(nèi)引物。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！