上海谷研實業(yè)有限公司
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禽腦脊髓炎病毒RT-LAMP試劑盒50次
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特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:禽腦脊髓炎病毒RT-LAMP試劑盒50次
英文名稱:RT-LAMP kit for avian encephalomyelitis virus
產(chǎn)品貨號:GOY6399
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
技術保護點:
一種用于檢測梅毒螺旋體的LAMP引物組,其特征在于,包括一對外引物和一對內(nèi)引物,其中,所述外引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的正向外引物和反向外引物,所述內(nèi)引物的核苷酸序列分別為SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的正向內(nèi)引物和反向內(nèi)引物。
使用方法:
一、禽腦脊髓炎病毒RT-LAMP試劑盒50次稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
下列是禽腦脊髓炎病毒RT-LAMP試劑盒50次的相關熱銷產(chǎn)品:
鉍粉 99.99% metals basis,200目防御素β2(DEFβ2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
化鎘 99.999%早期生長應答因子2(EGR2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鎘 99.999%,granular脂氧素A4(LXA4)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
碲化鎘 99.999%,5N胰脂肪酶(PL)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
碲化鎘 99.9999%,6N胰淀粉酶α2(AMY2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
銦 99.999%精氨酰氨基肽酶(RNPEP)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
銦 SP松弛素/胰島素樣肽受體1(RXFP1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鉛 flakes,SP抗神經(jīng)節(jié)苷脂M1抗體(Anti-GM1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鉛 99.99%,powder絲裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶2(MAPKAPK2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
鉛 99.999%,粒狀,1-3mm天青殺素1(AZU1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
水質(zhì)鉛標樣 1.0mg/l,分析標準品γ-促脂解激素(γLPH)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
高純 99.99% metals basis軟骨糖蛋白39(GP39)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
高純 99.999% metals basis溶酶體關聯(lián)膜蛋白2(LAMP2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
高純 分析標準品間隙連接蛋白37(CX37)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
硒粉 99.9% metals basis,200目間隙連接蛋白40(CX40)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
禽腦脊髓炎病毒RT-LAMP試劑盒50次Rhizoma arisaematis天南星染料法PCR鑒定試盒 負20度 一年2-4周 低溫
Semen lepidii葶藶子染料法PCR鑒定試盒 負20度 一年2-4周 低溫
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Rhizoma arisaematis天南星染料法PCR鑒定試盒 負20度 一年2-4周 低溫
Semen lepidii葶藶子染料法PCR鑒定試盒 負20度 一年2-4周 低溫
Medulla tetrapanacis通草染料法PCR鑒定試盒 負20度 一年2-4周 低溫
角鯊T25培養(yǎng)瓶細胞株兔肺大動脈平滑肌細胞
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芥子鹽T25培養(yǎng)瓶細胞株兔腹腔主動脈內(nèi)皮細胞