大鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物
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大鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物

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品牌 谷研
產(chǎn)品名稱 大鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物
英文名稱 Fat: Normal Rat Visceral Fat Derivatives
貨號 GOY-Y7004
規(guī)格 詳見說明書
商品介紹

參數(shù)規(guī)格:
大鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物Fat: Normal Rat Visceral Fat Derivatives
產(chǎn)品描述:內(nèi)臟脂肪組織是人體脂肪中的一種,與皮下脂肪不同,它圍繞著人的臟器,主要存在于腹腔內(nèi)。公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠內(nèi)臟脂肪組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。             

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mgRNA68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。            潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達圖譜。產(chǎn)品僅供科研使用

產(chǎn)品名稱

大鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物

英文名稱

Fat: Normal Rat Visceral Fat Derivatives

貨號

GOY-Y7004


凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

收到大鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物如何處理?產(chǎn)品僅供科研使用
1
、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3
、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1醋酸辛酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Octyl acetate質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EPHB4 Others Human EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) 大車前苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Plantamajoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人結(jié)直腸腺癌細胞;Caco-2大豆苷,黃豆苷 (標(biāo)準(zhǔn)品)Daidzin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

USP46 Others Human USP46 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 大黃酚(標(biāo)準(zhǔn)品)Chrysophanol質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

人間充質(zhì)干細胞-肝大黃素Emodin質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR
NCI-H716(
人結(jié)直腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2硬脂酸膽酯(>98%,BR)Cholesteryl stearate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

CoC1(人卵巢癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0142LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞)5×106cells/瓶×2 大鼠氣管上皮細胞;RTE1酸膽堿(>98%,BR)Choline bitartrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

中國倉鼠卵巢細胞;CHO鉻粒(>99%,BR)Chromium granular質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

PTPN2 Others Human PTPN2 / PTPT 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鉻粉(>99%BR)Chromium powder質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

肝實質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)氯化鉻六水(>98%,BR)Chromium(III) chloride, hexahydrate質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠內(nèi)臟脂肪組織提取物RET Others Human RET Kinase 人細胞裂解液 (陽性對照) EXTENDERPCR-TO-GELMASTERMIX,2XEXTENDER PCR-TO-GEL MASTER MIX, 2X生物技術(shù)級透明粉色液體FROZENsigma

ME-180 人子宮頸表皮癌細胞1,2-本二安;1,2-二安基本;鄰本二安 1,2-PhqnylqnqdicMinq;1,2-BqnzqnqdicMinq 92-24-2

NCI-H292人肺癌細胞(結(jié)轉(zhuǎn)移) NCI-H292 human lung cancer cells (lymph node metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS摸西沙星相關(guān)物質(zhì)A Moxifloxccin Rqlctqd CoMpound c;1-cyclopropyl-6,8-difluoro-7-[(4cS,7cS)-octcxy7no-6H-pyrrolo[3,4-b]pyridin-6-yl]-4-oxo-1,4-dixy7noinoneolinq-3-ccrboxylic ccid 12113-12-9

KITLG Protein Mouse 重組小鼠 SCF / C-kit ligand 蛋白 (His 標(biāo)簽)蘇旦IV,英文名或英文縮寫:Sudan Ⅳ,級別:BR,規(guī)格:5

人葡萄膜色素細胞;UM 人氣管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL26177-86-6D-果糖-6-1酸二鈉(-20)D-FRUCTOSE 6-PHOSPHATE DIwo7ium SALT

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公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
聯(lián)系賣家 郭小姐 (QQ:3004905818)
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