上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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主營產(chǎn)品: 從事生物科技, 醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)咨詢, 技術(shù)服務(wù), 技術(shù)開發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務(wù)咨詢(除經(jīng)紀(jì)), 電子商務(wù)(不得從事增值電信, 金融業(yè)務(wù)), 投資管理, 建設(shè)工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營), 化工原料及產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品, 監(jiān)控化學(xué)品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學(xué)品), 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備, 測量器材, 酒店設(shè)備, 環(huán)保設(shè)備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷售.
大鼠小腸粘膜組織提取物
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細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大鼠小腸粘膜組織提取物 | Rat Intestine: | GOY-Y6971 |
大鼠小腸粘膜組織提取物【Rat Intestine: Normal Small Intestinal Mucosa Derivatives】
產(chǎn)品描述:小腸粘膜是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機(jī)體面對病原微生物的道防線。因此,IECs除有吸收、分泌和等重要生理功能之外,在粘膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。小公司科技提供來自新鮮或冷凍大鼠小腸粘膜組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。
潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克?。?span lang="EN-US"><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜
注意事項(xiàng):
1. 接收到大鼠小腸粘膜組織提取物,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精(建議配置75%的酒精的水是過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
產(chǎn)品僅供科研使用5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
以下是公司正在的產(chǎn)品:
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2替諾福韋富馬酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Tenofovir/Tenofovir disoproxil fumarate
人肺間充質(zhì)干細(xì)胞(肺)(HPMSC)(5×105)替諾昔康質(zhì)量規(guī)格:>99%,BP2007,EP5.Tenoxicam
CM-H136人牙周膜成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL替拉替尼質(zhì)量規(guī)格:HSP90 抑制劑,BR,進(jìn)分17-AAG
小鼠瘤細(xì)胞;P388D1(IL-1) 小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸特拉唑嗪質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,二水合物Terazosin HCl
細(xì)胞名稱 種屬睪酮,素質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Testosterone
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞-懸浮生長RNAHOPC-os miRNA5 μg卡比多巴(標(biāo)準(zhǔn)品)(S)-Carbidopa質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 醋酸氯地孕酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Chlormadinone Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
兔角膜前基質(zhì)層成纖維細(xì)胞;RCFBF醋酸氯地孕酮Chlormadinone Acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%
HRT-S1細(xì)胞,人結(jié)腸癌細(xì)胞 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞,TE671 subline No.2細(xì)胞 小鼠源細(xì)胞鹽酸環(huán)丙沙星Ciprofloxacin HCL質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP34,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
HL-7702(人肝正常細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸環(huán)丙沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)Ciprofloxacin HCL質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠小腸粘膜組織提取物T24細(xì)胞,人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 大鼠肝癌細(xì)胞(wistar 大鼠),CBRH7919細(xì)胞 RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元耶爾森氏菌顯色培養(yǎng)基支RT
Ishikawa(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×21-羌基環(huán)己基本基同 1-xy7noxycyclohqxyl phqnyl kqtonq 947-19-3
hPC-PL-c 人類胎盤周細(xì)胞(hPC-PL) 500,000cells 小鼠巨噬細(xì)胞MMa白細(xì)胞稀釋液(計(jì)數(shù)液)500克RT
CL-0454TE-11(人食管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2NICKELCHLORIDE,HEXAHYDRATE錄化鎳,六水技術(shù)級綠色結(jié)晶RTsigma
HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/2/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4-基本并脒二鹽酸(+4℃)NA