操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。產品僅供科研使用
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。

人體皮膚癌組織提取物【Cancer: Human Skin Cancer Derivatives】
產品描述：皮膚癌是種發(fā)生于皮膚上的惡性腫瘤之一，按病理組織學主要分為基底細胞癌、鱗狀細胞癌、惡性黑色素瘤、惡性淋巴瘤、特發(fā)性出血性肉瘤（Kaposi肉瘤）、汗腺癌、隆突性皮膚纖維肉瘤、血管肉瘤等，其中以基底細胞癌和鱗狀細胞癌最為常見。公司科技提供來自新鮮或冷凍人體皮膚癌組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。這些臨床定義的人體組織標本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據IRB和HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發(fā)貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。             

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發(fā)貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證產品的質量。     

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。            潛在的應用： <1>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：產品僅供科研使用
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產品：
大鼠合成酶(NOS)試劑盒 Rat niic oxide syhase,NOS ELISA Kit 尼泊金異丙酯  Isopropyl Paraben 

小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒 ，英文名： Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit 保泰松  phenylbutazone  質量規(guī)格：>98%,USP

小鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA檢測試劑盒MouseActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAMELISAKit 96T/48T 保泰松（標準品）  phenylbutazone  質量規(guī)格：HPLC>99%,標準品

人高密度脂蛋白3(HDL3)試劑盒 Human high density lipoprotein 3,HDL3 ELISA Kit 保泰松鈣  phenylbutazone Calcium  質量規(guī)格：>98%

Ratheatshockprotein20,hSP-20ELISAKit大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 保泰松鈉  phenylbutazone   質量規(guī)格：>98%

BCL2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 吡非尼酮，哌非尼酮  Pirfenidone  質量規(guī)格：>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISA試劑盒小鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 吡非尼酮,哌非尼酮(標準品)  Pirfenidone  質量規(guī)格：HPLC>99%,標準品

小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒 ，英文名： Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit 匹伐他汀鈣  Pitavastatin Calcium /NK-104  質量規(guī)格：≥98.0% 相關物質及對應異構體均小于1%

小鼠血管生成素1(ANG-1)ELISA檢測試劑盒MouseAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 96T/48T 匹伐他汀鈣(標準品)  Pitavastatin Calcium /NK-104  質量規(guī)格：HPLC≥98.0% ,標準品

人高密度脂蛋白2(HDL2)試劑盒 Human High density lipoprotein 2,HDL2 ELISA Kit 化鉀  Potassium iodide  質量規(guī)格：>99%,AR

Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 吡喹酮  Praziquantel  質量規(guī)格：>98.5%,BR
人體皮膚癌組織提取物組蛋白H4乙酰化檢測試劑盒10/20等 尼泊金乙酯-d5  Ethyl-d5 Paraben 

組蛋白染色質沉淀(CHIP)分析試劑盒10/20 尼泊金甲酯-d4  Methyl Paraben-d4 

組分氧化應激活性氧(ROS)光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒50 尼泊金芐酯  Benzyl Paraben 

組分氧化應激活性氧(ROS)光澤精化學發(fā)光法定量檢測試劑盒50 尼泊金乙酯  Ethyl Paraben 

組分氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒50 四環(huán)素復鹽  Tetracycline phosphate complex 

組分氧化應激活性氧(ROS)魯米諾化學發(fā)光法定量檢測試劑盒50 四環(huán)素  Tetracycline  質量規(guī)格：進分

組織固著液(Bouin固著液)50毫升 4-鹽酸差向四環(huán)素  4-Epitetracycline  

組織灌注固著液(4%中性多聚甲固著液)50毫升 四環(huán)素-d6  Tetracycline-d6 

 4-差向-四環(huán)素-d6  4-epi-Tetracycline-d6 

 4-差向-四環(huán)素  4-Epi-Tetracycline
注意事項：
1. 接收到人體皮膚癌組織提取物，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。