操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。產(chǎn)品僅供科研使用
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

人尿道組織提取物【Human Ureter: Normal Lliac Artery Derivatives】
產(chǎn)品描述：尿道是從膀胱通向體外的管道。男性尿道細(xì)長，長約18cm，起自膀胱的尿道內(nèi)口，上于尿道外口，行程中通過前列腺部、膜部和陰莖海綿體部，男性尿道兼有排尿和排精功能。女性尿道粗而短，長約5cm，起于尿道內(nèi)口，經(jīng)陰道前方，開口于陰道前庭。公司科技提供來自新鮮或冷凍人尿道組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB和HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。             

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。            潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅供科研使用
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大鼠神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)試劑盒 Rat Neuron-specific enolase,NSE ELISA Kit 甾醇；(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ergosterol  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(G1)試劑盒 Rat neuregulin-1,G1 ELISA kit 甾醇(90%)  Ergosterol  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 ，英文名： Hsp-60 ELISA Kit 高藜蘆酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  (3,4-Dimethoxyphenyl)acetic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%

小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA檢測試劑盒MouseCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 96T/48T PD0325901  PD-0325901  質(zhì)量規(guī)格：>99%,ATP非競爭性的MEK抑制劑

人鈣網(wǎng)蛋白(C)試劑盒 Human C ELISA Kit 西他塞坦鈉/司他生坦鈉  Sitaxsentan ; TBC-11249; Thelin  質(zhì)量規(guī)格：度99%

RatIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 西他塞坦鈉/司他生坦鈉  Sitaxsentan ; TBC-11250; Thelin  質(zhì)量規(guī)格：度99%

CASPASE-1蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25 西他塞坦鈉/司他生坦鈉  Sitaxsentan ; TBC-11251; Thelin  質(zhì)量規(guī)格：度99%

Mouselipoproteinlipase,LPLELISA試劑盒小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 輪環(huán)藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸  Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid  質(zhì)量規(guī)格：>95%

小鼠熱休克蛋白40(HSP40)ELISA試劑盒 ，英文名： HSP40 ELISA Kit 拉米夫定  Lamivudine  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,USP可用于細(xì)胞培養(yǎng)

豬胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒PorcineInsulin,INSELISAKit 96T/48T 拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)  Lamivudine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠晝夜節(jié)律蛋白同源物2(PER2)試劑盒 Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit 鹽酸三氟拉嗪  Trifluoperazine di  質(zhì)量規(guī)格：>99%

英文名稱HumanIerleukin-11(IL-11)ELISAKIT人白介素-11(IL-11)規(guī)格：96T/48T 鹽酸三氟拉嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)  Trifluoperazine di  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人尿道組織提取物小鼠黑色素瘤(Melanoma)ELISA試劑盒 ，英文名： Melanoma ELISA Kit 甾醇(90%)  Ergosterol  質(zhì)量規(guī)格：>90%,BR

小鼠黑色素瘤抗原家族A1(MAGEA1)ELISA試劑盒 ，英文名： MAGEA1 ELISA Kit 蔓荊子黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Vitexicarpin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 芒果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)  Mangiferin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： MC Ab ELISA Kit 芒果苷  Mangiferin  質(zhì)量規(guī)格：≥90%,BR

小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISA檢測試劑盒Mousemelanocyteaibody,MCAb 96T/48T 毛蕊異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)  Calycosin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)ELISA試劑盒 ，英文名： MCAM ELISA Kit 毛蕊異黃酮苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Calycosin-7-O-β-D-glucoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠亨廷頓蛋白(HTT)ELISA試劑盒 ，英文名： HTT ELISA Kit 沒食子兒茶素（標(biāo)準(zhǔn)品）  GC;  (-)-gallocatechin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 沒食子兒茶素沒食子酸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  GCG;(?)-Gallocatechin gallate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒 ，英文名： sm Actinin-α ELISA Kit 沒食子酸  Gallic acid  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 沒食子酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Gallic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
注意事項(xiàng)：
1. 接收到人尿道組織提取物，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。