操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。產(chǎn)品僅供科研使用
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物【Rat Skin: Normal Epidermal Keratinocytes Derivatives】
產(chǎn)品描述：大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物是從大鼠原代成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取的，大鼠原代成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞從正常大鼠皮膚組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。             

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。            潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：產(chǎn)品僅供科研使用
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒 Rat thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit 羅漢果黃素 HPLC≥98% 10mg

大鼠血小板活化因子(PAF)試劑盒 Rat platelet activating factor,PAF ELISA KIT 羅漢果黃素  Grosvenorine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA檢測(cè)試劑盒RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 96T/48T 羅漢果苷VI HPLC≥98% 20mg

大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)試劑盒 Rat platelet membrane glycoprotein ⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢa ELISA Kit 羅漢果苷IV HPLC≥98% 20mg

大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)試劑盒 Rat Platelet membrane glycoprotein Ib,GPIb ELISA Kit 羅漢果苷III HPLC≥98% 20mg

大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)試劑盒 Rat Platelet membrane glycoprotein IIb,GPIIb ELISA Kit 羅漢果苷IIe HPLC≥95% 20mg

大鼠血小板生成素(TPO)試劑盒 Rat Thrombopoietin,TPO ELISA kit 羅格列酮鹽酸鹽  rosiglitazone  

大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子A(PDGF-A)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor A,PDGF-A ELISA kit 羅格列酮堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Rosiglitazone base  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AA(PDGF-AA)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AA,PDGF-AA ELISA kit 羅格列酮堿  Rosiglitazone base  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%

大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AB,PDGF-AB ELISA kit 羅格列酮（鉀鹽）  Rosiglitazone (potassium salt)
大鼠脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒 Rat lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit 千層紙素A-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷  Oroxyloside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

英文名稱HumanNF-kBELISAKit人NF-kB規(guī)格：96T/48T 泮托拉唑鈉1.5水合物  Pantoprazole Sesquihydrate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

動(dòng)物組織羥脯氨酸(hydroxyproline)比色法定量檢測(cè)試劑盒20 泮托拉唑鈉1.5水合物(標(biāo)準(zhǔn)品)  Pantoprazole Sesquihydrate  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%，標(biāo)準(zhǔn)品

α-bungarotoxin,α-BGTELISA試劑盒α-銀環(huán)蛇(α-BGT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T (S)-10-羥基喜樹堿;10-羥基喜樹堿  (s)-10-hydroxycamptothecin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠前列腺素G/H合酶1(PTGS1)ELISA試劑盒 ，英文名： PTGS1 ELISA Kit 10-羥基喜樹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  (s)-10-hydroxycamptothecin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,S構(gòu)型，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseSolubleIercellularAdhesionMolecule1,sICAM-1ELISAKit 96T/48T 甘草素（消旋）  Liquiritigenin  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人復(fù)制蛋白A(RPA-70)試劑盒 Human RPA-70 ELISA Kit 芹糖甘草苷；甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷  Liquiritin apioside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

RatIerleukin27,IL-27ELISAKit大鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 芹糖異甘草苷；異甘草苷芹糖  Isoliquiritin apioside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CDK2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克 白屈菜紅堿(標(biāo)準(zhǔn)品）  Chelerythrine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

MousemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/H-2ⅠELISA試劑盒小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T TAE684  NVP-TAE684  質(zhì)量規(guī)格：>98%,選擇性的ALK抑制劑
大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物PorcineOrexieceptor,OXRELISA試劑盒豬食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 六氫姜黃素 HPLC≥98% 5mg

PorcineOrexinB,OX-BELISA試劑盒豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 羅旦梅交酯 HPLC≥98% 5mg

PorcineOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISA試劑盒豬骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 羅漢松黃酮 A. HPLC≥98% 5mg

Porcineoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLELISA試劑盒豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 洛柯堿 HPLC≥98% 5mg

Porcinephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISA試劑盒豬0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 駱駝蓬堿 HPLC≥98% 5mg

Porcineplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISA試劑盒豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 落葉松樹脂醇 HPLC≥98% 5mg

Porcineplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISA試劑盒豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 馬兜鈴內(nèi)酰胺 FI HPLC≥98% 5mg

Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 馬桑寧內(nèi)酯 HPLC≥98% 5mg

Porcineplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFELISA試劑盒豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 馬桑亭 HPLC≥98% 5mg

PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISA試劑盒豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 馬尾杉醇 C HPLC≥98% 5mg
注意事項(xiàng)：
1. 接收到大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞提取物，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。