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主營產(chǎn)品: 從事生物科技, 醫(yī)藥科技領域內(nèi)的技術(shù)咨詢, 技術(shù)服務, 技術(shù)開發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務咨詢(除經(jīng)紀), 電子商務(不得從事增值電信, 金融業(yè)務), 投資管理, 建設工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營), 化工原料及產(chǎn)品(除危險化學品, 監(jiān)控化學品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學品), 實驗室設備, 測量器材, 酒店設備, 環(huán)保設備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷售.
大鼠皮下脂肪細胞提取物
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主營產(chǎn)品
從事生物科技, 醫(yī)藥科技領域內(nèi)的技術(shù)咨詢, 技術(shù)服務, 技術(shù)開發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務咨詢(除經(jīng)紀), 電子商務(不得從事增值電信, 金融業(yè)務), 投資管理, 建設工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營), 化工原料及產(chǎn)品(除危險化學品, 監(jiān)控化學品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學品), 實驗室設備, 測量器材, 酒店設備, 環(huán)保設備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷售.
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。產(chǎn)品僅供科研使用
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
大鼠皮下脂肪細胞提取物【Rat Fat: Normal Subcutaneous Fat CellsDerivatives】
產(chǎn)品描述:大鼠皮下脂肪細胞提取物是從大鼠原代皮下脂肪細胞提取的,大鼠原代皮下脂肪細胞從正常大鼠脂肪組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。
cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。
蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應用: <1>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學;<6>芯片研究與表達圖譜。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大鼠皮下脂肪細胞提取物 | Rat Fat: | GOY-Y6804 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:產(chǎn)品僅供科研使用
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
蛋白飽和溶液1毫升 硫酸博萊霉素/博來霉素/爭光霉素 Bleomycin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:含量1.5~2.0U/mg,BR
蛋白變性液10毫升 硫酸鉍(>98%,BR) Bismuth (III) sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
蛋白表位標記技術(shù)試劑盒5 硫酸鋇(>98%,BR) Barium sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
蛋白儲存液10毫升 硫酸巴龍霉素(標準品) Paromomycin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
蛋白電泳10倍濃縮運行緩沖液500毫升 硫酸巴龍霉素 Paromomycin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:≥675 U/mg,USP28
蛋白電泳2倍樣品處理液10毫升 硫酸銨鋁十二水(>98%,BR) Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
蛋白電泳SYPRO橙色染色試劑盒10 硫酸銨 Ammonium sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級
蛋白電泳固綠染色試劑盒10 硫酸氨基葡萄糖(標準品) Glucosamine sulfate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
蛋白電泳麗春紅染色試劑盒10 硫酸氨基葡萄糖 HPLC≥98% 20mg
蛋白電泳尼羅紅染色試劑盒20 硫酸安普霉素,硫酸阿布拉霉素 Apramycin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>500U/mg,BR
小鼠嘌呤核苷酸0酸化酶(PNP)ELISA試劑盒 ,英文名: PNP ELISA Kit 甲酰胺 Formamide 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
小鼠S100蛋白(S-100)ELISA檢測試劑盒MouseSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 96T/48T 聚乙二醇8000 PEG 8000 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學級
人分泌成分(SC)試劑盒 Human secretory compone,SC ELISA Kit 氯化鋰(分子生物學級) Lithium chloride 質(zhì)量規(guī)格:>98%
RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 硫酸亞鐵銨六水 Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
Chu’sN6完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 紅四氮唑 TTC,TTZ,Tetrazolium Red 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Mousemucin-5subtypeB,MUC5BELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 磺胺甲氧噠嗪 Sulfamethoxypyridazine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA試劑盒 ,英文名: CO ELISA Kit 磺胺甲氧噠嗪(標準品) Sulfamethoxypyridazine 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA檢測試劑盒MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 96T/48T TCEP;三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽 TCEP; 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
人肺炎支原體抗體(MP-Ab)試劑盒 Human Mycoplasma pneumoniae aibody,MP-Ab ELISA Kit 硫代硫酸鈉五水(AR) thiosulfate, pentahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
RatLaminin,LNELISAKit大鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 化鈉(AR) iodide 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,AR
大鼠皮下脂肪細胞提取物英文名稱MouseIL-1sRⅠ小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 9-(2',3',5'-三-氧基-苯甲基-β-D-阿糖)腺嘌呤 9-(2',3',5'-Tri-O-benzyl-β-D-arabinofuranosyl)adenine
英文名稱MouseIL-1sRⅡ小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)規(guī)格:96T/48T 紅-9-(2-羥基-3-壬烷基)腺嘌呤鹽酸鹽 EHNA
英文名稱MouseIL-1sRⅡ小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)規(guī)格:96T/48T 2-氟腺嘌呤 2-Fluoroadenine
英文名稱MouseIL-1β小鼠白介素1β(IL-1β)規(guī)格:96T/48T 硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸鈉鹽 Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate salt
英文名稱MouseIL-2sRα小鼠白介素2可溶性受體α鏈(CD25)(IL-2sRα)規(guī)格:96T/48T 煙酸腺嘌呤二核苷鈉鹽 Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate salt
英文名稱MouseIL-2sRβ小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)規(guī)格:96T/48T 煙酸腺嘌呤二核苷酸鈉鹽 Nicotinic acid adenine dinucleotide salt
英文名稱Mouseinducibleniicoxidesyhase小鼠誘導型合成酶(iNOS)規(guī)格:96T/48T α-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 α-Nicotinamide adenine dinucleotide
英文名稱MouseInhibinA小鼠抑制素A(INHA)規(guī)格:96T/48T NAD+, 鋰鹽 NAD+, Lithium Salt
英文名稱MouseinhibinB小鼠抑制素B(INHB0規(guī)格:96T/48T 9-甲基-d3-腺嘌呤 9-Methyl-d3 Adenine
英文名稱MouseInsulieceptorβ(ISR-β)小鼠胰島素受體β(ISR-β)規(guī)格:96T/48T β-煙酰胺腺嘌呤二核苷, 縮減環(huán)已基銨鹽 β-Nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, reduced tetra(cyclohexyl ammonium) salt
注意事項:
1. 接收到大鼠皮下脂肪細胞提取物,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。