細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人體胃癌組織源細(xì)胞提取物【Human Cancer: Gastric Cancer Tissues Cells Derivatives】
產(chǎn)品描述：人胃癌組織源細(xì)胞細(xì)胞提取物是從人原代胃癌組織源細(xì)胞細(xì)胞提取的，人原代胃癌組織源細(xì)胞細(xì)胞從人胃癌組織組織制備。人胃癌組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。        

cDNA制備：純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA，1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。   

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，離心去除組織碎片，通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。       

潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克?。?span lang="EN-US"><2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到人體胃癌組織源細(xì)胞提取物，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
產(chǎn)品僅供科研使用5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf5-甲基尿苷5-Methyluridine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-核糖(標(biāo)準(zhǔn)品)D-(-)-Ribose質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

轉(zhuǎn)化細(xì)胞D-核糖D-(-)-Ribose質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

P3X63Ag8細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞 人十二指腸腺癌細(xì)胞,HuTu-80細(xì)胞 CM-H029人臍帶單核細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL二硫蘇糖醇(DTT)DL-Dithiothreitol質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)

大鼠胚胎心肌細(xì)胞;H9c2(2-1)D(+)-二糖D(+)-Turanose質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
小鼠海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞MA-h酸性紅88 Acid Red 88質(zhì)量規(guī)格：AR,進(jìn)分

CDKL2 Others Human 人 CDKL2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酸性紅183Acid Red 183質(zhì)量規(guī)格：AR,原裝進(jìn)口

293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA酸性紅9Acid Red 9質(zhì)量規(guī)格：AR,進(jìn)分

MDCK細(xì)胞，狗腎細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,RKO細(xì)胞 CM-H101新生兒表皮角化細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL孔雀石綠Malachite green質(zhì)量規(guī)格：BS

大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞;C6燦爛綠,亮綠Brilliant green質(zhì)量規(guī)格：BS
VWC2 Others Human 人 VWC2 / Brorin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2′-脫氧腺苷250克

人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪季務(wù)四醇鱗醋酯 2,6,7-Trioxc-1-phosphcbicyclo2.2.2octcnq-4-mqthcnol, 1-oxidq 2301-78-0

AKT1 Others Human 人 AKT1 / PKB / PKBα 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 二硫代蘇糖醇100克

人角膜細(xì)胞RNAHK miRNA5 μg四化1克

7721細(xì)胞，7721肝癌細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移),NCI-H292細(xì)胞 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪98103-87-82-本基-1-;β-本;2-本;β-羥基異本;β-甲基本基乙醇2-pxenyl-1-propanol;2-pxenylpropyl alcohol;β-xy7noxyisopropylbenzene;β-metxylpxenetxyl alcohol;β-xy7noxycuMene;xy7notropic alcohol
人體胃癌組織源細(xì)胞提取物大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) 人纖維肉瘤，HT-1080細(xì)胞 SW 900 [SW-900; SW900](人肺癌細(xì)胞)大腸桿菌顯色培養(yǎng)基13.5×15cm/張

人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;U-87 MG [U87MG;U87 MG]美滿霉素 Minocycline hydrochloride,98% 13614-98-7 100MG 通用試劑

PDPN Others Human 人 PDPN / Podoplanin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羌安 xy7noXYLcMINq 7803-49-8

扁桃體上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物TEpiCGS血清羊抗人IgA1公斤RT

EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 26386-88-9疊氮1酸二本酯 97%Dipxenylphosphoryl azide