操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。產(chǎn)品僅供科研使用
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

人臍靜脈平滑肌細胞提取物【Human Umbilical: Normal Umbilical Vein Smooth Muscle Cell Derivatives】
產(chǎn)品描述：人臍靜脈平滑肌細胞提取物是從人原代臍靜脈平滑肌細胞提取的，人原代臍靜脈平滑肌細胞從正常人臍靜脈組織制備。正常人臍靜脈組織采集自各地方醫(yī)院，采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。             

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。            潛在的應(yīng)用： <1>已知基因的PCR克??；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達圖譜。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：產(chǎn)品僅供科研使用
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人表皮角質(zhì)細胞cDNAHEK cDNA培美曲塞-15N,13C5Pemetrexed - Labeled 15N,13C5

RPE Others Mouse 小鼠 RPE / RPE2-1 人細胞裂解液 (陽性對照) N-硝基-L-精氨酸甲酯N'-Nitro-L-arginine-methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%

人脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mLN-苯甲酰-L-酪氨酸乙酯(BTEE)N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester質(zhì)量規(guī)格：>98%

ZA1細胞，轉(zhuǎn)S9基因倉鼠卵巢細胞 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤) 中國倉鼠肺細胞;R 1610 [R1610]AEBSF絲氨酸抑制劑AEBSF HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

EFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A2 / EFNA2 蛋白AEBSF(進分)AEBSF HCl質(zhì)量規(guī)格：>97%,進分TCI A2215
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2酸性紫49Acid Violet 49質(zhì)量規(guī)格：IND,進分

HGF Others Mouse 小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) 皂黃Metanil yellow質(zhì)量規(guī)格：AR

原代心肌細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml橙黃G；酸性橙10Orange G質(zhì)量規(guī)格：BS

HUVEC(原代)細胞，人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞 HPVl6 E6、E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細胞,TC-1細胞 人雪旺細胞總RNAHSC NA橙黃ⅡOrangeⅡ質(zhì)量規(guī)格：AR

QGY-7703(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2柯衣定Chrysoidin質(zhì)量規(guī)格：AR
Jurkat, Clone E6-1人T細胞白血病細胞 Jurkat, Clone and E6-1 in human T lymphocyte leukemia cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS1,5-萘二磺酸四水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%Naphthalene-1,5-disulfonic acid tetrahydrate

FGF17 Protein Human 重組人 FGF17 蛋白色酚AS醋酸鹽(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCNaphthol AS acetate

BC3H1(小鼠腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 人表皮角質(zhì)細胞-HEK-a氯代丁二乙(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRNCS, N-Chlorosuccinimide

人胃癌細胞;MKN-45n-Dodecyl-b-D-thiomaltoside質(zhì)量規(guī)格：BRn-Dodecyl-b-D-thiomaltoside

人卵巢微血管內(nèi)皮細胞(HOMEC) ( 5×105 )1,4-雙[(1H-咪唑-1-基)甲基]苯(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)1,4-Bis[(1H-imidazol-1-yl)methyl]benzene
人臍靜脈平滑肌細胞提取物Caki-2 人腎透明細胞癌細胞 Caki-2 human renal clear cell carcinoma cells McCoy's 5A Media (Modified with icine) 10%FBSHRP標記羊抗馬IgG250克

EGFL7 Protein Mouse 重組小鼠 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標簽)1-拂-2-肖基本 1-Fluoro-2-nitnobqnzqnq 1493-7-

TG-905(人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 心臟微血管內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-GLUCOSE,ANxy7noUSD-葡萄糖,無水生物技術(shù)級白色精細粉末RTsigma

大鼠海馬神經(jīng)元RN-hxy7noGENPEROXIDEACS級透明無色液體COLD不sigma

TAOK3 Others Human 人 TAOK3 / JIK / MAP3K18 (aa 1-411) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 5337-93-94-甲基本4'-metxylpropiopxenone
注意事項：
1. 接收到人臍靜脈平滑肌細胞提取物，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。