大鼠角膜成纖維細胞
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大鼠角膜成纖維細胞

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品牌 谷研
產(chǎn)品名稱 大鼠角膜成纖維細胞
英文名稱 RatEye:NormalCornealFibroblasts
貨號 GOY-Y6519
規(guī)格 詳見說明書
商品介紹

凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。產(chǎn)品僅供科研使用

參數(shù)規(guī)格:
大鼠角膜成纖維細胞RatEye:NormalCornealFibroblasts
產(chǎn)品描述:大鼠角膜成纖維細胞是結(jié)締組織中最常見的一種細胞,其功能是可在角膜創(chuàng)傷后修復(fù)組織。公司提供的大鼠角膜成纖維細胞,采用胰酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品大鼠角膜成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒(RatEyePrimaCellNormalCornealFibroblastsCatNo.3-7505)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞等)的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,大鼠角膜成纖維細胞傳10代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

產(chǎn)品名稱

大鼠角膜成纖維細胞

英文名稱

RatEye:NormalCornealFibroblasts

貨號

GOY-Y6519

實驗要點及說明
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。產(chǎn)品僅供科研使用
人非小細胞肺癌細胞;NCI-H231,4-二苯氧基苯(>98.0%(GC))1,4-Diphenoxybenzene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)

CD200R1 Others Human CD200R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,4'-二羧基二苯(>98.0%(GC)(T))4,4'-Dicarboxydiphenyl Ether質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)

NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基熒烷(>98.0%(HPLC)(T))6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)

STC2 Others Human STC2 / Stanniocalcin 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫代基脲shēng huà shì jì容量:25

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細胞順式屋頭醋(-20) 98% CIS-cCONITIC cCID 282-84-

3T3/e細胞,小鼠成纖維細胞 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞,JEG-3/VP16-IL-2細胞 人腎系膜細胞RNAHRMC miRNA5 μg金安O cURcMINq O 462-7-

恒河猴肺細胞;RM-L1精酸瓊脂糖凝膠4Bshēng huà shì jì容量:1

EPHB4 Others Human EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照) D- 500g/1kg/5kg/25kg原裝 Sigma G8270
大鼠角膜成纖維細胞ERBB4 Others Human / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照) CamsylateD-樟腦-10-磺酸25BR,99%

大鼠腦動脈血管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-鱗酰醇安 99%(-20) 1,2-DIMYRISTOYL-SN-GLYCqRO-3-PHOSPHOqTHcNOLcMINq 998-07-

RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞 RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS3-(N-嗎啉基)-2-羌基炳磺醋 (MOPSO) MOPSO 68399-77-9

IFNA7 Protein Human 重組人 Ierferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標簽)BafilomycinA1fromStreptomycesgriseus巴弗洛霉素A1900U生物技術(shù)級,90%

MDA-MB-436(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 L929(成纖維細胞)1723-00-8D-派啶-2-羧酸D(+)-Pipecolinic acid
收到大鼠角膜成纖維細胞如何處理?
1
、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3
、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的大鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

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公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
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