大鼠冠狀動脈內皮細胞
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品牌 谷研
產品名稱 大鼠冠狀動脈內皮細胞
英文名稱 RatCoronary:NormalCoronaryArteryEndothelialCells
貨號 GOY-Y6479
規(guī)格 詳見說明書
商品介紹

凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。產品僅供科研使用

參數(shù)規(guī)格:
大鼠冠狀動脈內皮細胞RatCoronaryNormalCoronaryArteryEndothelialCells
產品描述:大鼠冠狀動脈內皮細胞分離自正常大鼠冠狀動脈內皮細胞,呈單層扁平分布。內皮細胞或血管內皮是一薄層的專門上皮細胞,由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內壁,是血管管腔內血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至最少的微血管。公司提供的大鼠冠狀動脈內皮細胞,采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產品大鼠冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)試劑盒(RatcoronaryPrimaCell:NormalcoronaryarteryendothelialcellsCatNo.3-7204)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞、纖維細胞等)的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,大鼠冠狀動脈內皮細胞傳3-5代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

產品名稱

大鼠冠狀動脈內皮細胞

英文名稱

RatCoronaryNormalCoronaryArteryEndothelialCells

貨號

GOY-Y6479

實驗要點及說明
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。產品僅供科研使用
人骨肉瘤細胞;HOS苯扎氯銨(標準品)Alkyldimethylbenzylammonium chloride質量規(guī)格:供HPLC法檢查用和容量法含量測定用

人成纖維細胞(HMF)(5×105)苯扎氯銨(標準品)Alkyldimethylbenzylammonium chloride質量規(guī)格:含量測定用

CM-H112人脂肪細胞完全培養(yǎng)基100mL甲硫酸新斯的明(標準品)Neostigmine methyl sulfate質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品

小鼠漿細胞瘤;MPC-11 小鼠直腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL甘草酸二鉀(標準品)Dipotassium glycyrrhizinate質量規(guī)格:含量測定

rEPC,大鼠內皮祖細胞-骨髓 Rattus尼美舒利(標準品)Nimesulide質量規(guī)格:含量測定
長尾綠猴腎細胞;4647氧化鑭(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide質量規(guī)格:>99%,EP

TEK Others Human Tie2 / CD202b / TEK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 氯化鎂六水(分子生物學)Magnesium chloride, hexahydrate質量規(guī)格:>99%,分子生物學級

CL-0217SP2/0(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2醋酸錳四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate質量規(guī)格:>98%,BC

LX-2, 人肝星形細胞株 小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素),GT1.1細胞 OK(負鼠(opossum)腎細胞)神經氨酸酶(10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens質量規(guī)格:≥10 units/ mg

大鼠冠狀動脈內皮細胞SUNE-1亞株13-9B細胞,人鼻咽癌細胞系 小鼠胚胎成纖維細胞,BALB/3T3 clone A31細胞 CM-H063人腎皮層上皮細胞完全培養(yǎng)基100mLPOPSO,FREEACIDPOPSO生物技術級白色粉末RTsigma

OP9(小鼠骨髓基質細胞) 5×106cells/瓶×2雙琥珀酰亞安忻二醋酯磺醋內鹽 95% (H-NMR)(-20°C) BS3 8436-77-9

Promocell C-27020 Osteoblast MineralizationMedium, 成骨細胞礦化培養(yǎng)基(即用型) 500ml5,5'-二硫雙-(2-... 5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid), ... 69-78-3 1G 染色劑

肝實質細胞Many types of cells包裝:5 ×105(1ml)氧合血紅蛋白,英文名或英文縮寫:Oxyhemoglobin,級別:BR,98%,規(guī)格:1

PRKD2 Others Human PRKD2 / PKD2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (亞油酸)
收到大鼠冠狀動脈內皮細胞如何處理?
1
、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據)。
2
、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3
、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據);建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的大鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

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公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
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