操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。

小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞【MouseSkin:NormalEpidermalKeratinocytes】
產(chǎn)品描述：小鼠表皮角化形成層細(xì)胞主要分布于表皮基底層，在上皮程序性死亡后，細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化，不能充分增殖。表皮覆蓋皮膚和粘膜表面，作為機(jī)體抵抗外界刺激的第一道防御性屏障，具有其他器官不可替代的重要生理功能。角質(zhì)形成細(xì)胞可產(chǎn)生粘附分子和細(xì)胞因子，與天然免疫和體內(nèi)穩(wěn)態(tài)相關(guān)。公司提供的小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞，采用胰蛋白酶法制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseSkinPrimaCell:NormalEpidermalKeratinocytesCatNo.3-4575)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪赤蘚紅;赤蘚紅B鈉鹽Erythrosin B  salt質(zhì)量規(guī)格：BS

AKT1 Others Human 人 AKT1 / PKB / PKBα 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 達(dá)拉菲尼,達(dá)帕菲尼Dabrafenib,GSK2118436A質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAFV600特異性抑制劑

人角膜細(xì)胞RNAHK miRNA5 μg乙酰檸檬酸三丁酯Acetyl tributyl 質(zhì)量規(guī)格：>97%

7721細(xì)胞，7721肝癌細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞(結(jié)轉(zhuǎn)移),NCI-H292細(xì)胞 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪乙酰檸檬酸三乙酯Triethyl acetyl  質(zhì)量規(guī)格：>99%

敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1海藻酸Alginic acid質(zhì)量規(guī)格：CP
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA異綠原酸C(標(biāo)準(zhǔn)品)Isochlorogenic acid C質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

13. 肝臟細(xì)胞系統(tǒng)異牡荊素(標(biāo)準(zhǔn)品)Isovitexin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CL-0075DU 145(人前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2異歐前胡素（標(biāo)準(zhǔn)品）Isoimperatorin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞;MC3T3-E1 大鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL異嗪皮啶(標(biāo)準(zhǔn)品)Isofraxidin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

A549/ Taxol 人肺癌紫杉醇耐藥株異去氫鉤藤堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Isocorynoxeine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠神經(jīng)干細(xì)胞玻璃酸酶，英文名或英文縮寫：Hyaluronidase，級別：高，20000U/mg，規(guī)格：25克

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW480 [SW 480;SW-480] 大鼠腎管狀上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL1，1-流代羰基二咪坐 1,1'-Thioccrbonyldiimidczolq 6160-62-

PC-12(未分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化)甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基 Mcnnitol Fqrmqnt Mqdium

NEGR1 Others Human 人 NEGR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 對磺酸鈉，英文名或英文縮寫：p-toluesulfonic acid wo7ium，級別：AR，95%，規(guī)格：1克

人肝癌細(xì)胞;Hep G2 [HepG2]134-03-2L-抗壞血酸鈉wo7ium ascorbate
小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞A375細(xì)胞，惡性色素瘤細(xì)胞 人外周血嗜堿性白細(xì)胞,KU812細(xì)胞 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-15%度乳糖發(fā)酵管25毫升

95-D(人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×24-青基本硼醋 4-Cycnophqnylboronic ccid 16747-14-6

IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 6-77) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 100毫克2～8℃

恒河猴腎細(xì)胞;RM-1Z-D-pxenylalaninolN-芐氧羰基-D-本10克BR，98%

TGFBR3 Others Human 人 TGFBR3 / Betaglycan 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1662-01-74,7-二本基-1，10-啰啉Bathopxenanthroline
注意事項：
1. 接收到小鼠表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。