小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞【MouseEmbryo:NormalFetalDermalFibroblasts】
產(chǎn)品描述：小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞主要分布于黏膜和皮下疏松結(jié)締組織，胞質(zhì)內(nèi)富含嗜堿性顆粒，細(xì)胞表面能夠表達(dá)高親和力FcεRI，可結(jié)合游離IgE，參與I型超敏反應(yīng)。公司提供的小鼠胎兒真皮成纖維均來(lái)自正常小鼠胎兒真皮組織，采用組織塊培養(yǎng)法制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專(zhuān)利產(chǎn)品小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseEmbryoPrimaCell:NormalFetalDermalFibroblastsCatNo.3-4540)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞傳10代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞(HCSMC)(5×105 )巴氯芬Baclofen質(zhì)量規(guī)格：度>99,USP

CL-0358HKC(人胚腎上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2氨氯地平Amlodipine質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR

人胰腺癌細(xì)胞;AsPC-1 大鼠皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氨氯地平（標(biāo)準(zhǔn)品）Amlodipine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

EMT-6 小鼠癌尼扎替丁Nizatidine質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP31

MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 羧甲基纖維素Carboxymethyl cellulose 質(zhì)量規(guī)格：粘度(1%,25℃) ≥500 mpa.s
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鹽酸羅沙替丁醋酸酯Roxatidine acetate HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%

大鼠子宮平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL培美曲塞酸Pemetrexed質(zhì)量規(guī)格：>98%

CHO-K1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1 Chinese hamster ovary cell subline F-12K+10%FBS培美曲塞酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pemetrexed質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品

胰島素樣生長(zhǎng)因子周效磺胺(磺胺多辛)sulphadoxine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

E.G7-OVA(小鼠T瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人卵巢成纖維細(xì)胞HOF周效磺胺(標(biāo)準(zhǔn)品)sulphadoxine質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠子細(xì)胞;U14 小鼠肝竇內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLMALTEXTRACT麥牙提取物細(xì)菌學(xué)級(jí)粉末COLD不sigma

NSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Rattus3-羌基-2-丁同;?；?/span>;酰基醇;偶姻 3-xy7noxy-2-butcnonq;ccqtoin;2,3-Butcnolonq;DiMqthylkqtol;γ-xy7noxy-β-oxobutcnq 213-86-0

F2 Others Mouse 小鼠 FII / F2 / Thrombin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) I-INOSITOL肌醇高級(jí)白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma

人少突膠質(zhì)細(xì)胞乳酸過(guò)氧化物酶1克*5

CSF1 Others Mouse 小鼠 M-CSF / CSF-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 107-98-21-甲氧基2-1-metxoxy-2-propanol
小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞人急性母細(xì)胞性白血病細(xì)胞;MOLT-4SUCROSE,20%STERILESOLUTION蔗糖溶液蛋白組學(xué)級(jí)無(wú)色至淡黃色無(wú)混濁液體RTsigma

VNN1 Others Human 人 VNN1 / Vanin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 亮藍(lán)R;考馬斯亮藍(lán)R250;考馬斯亮藍(lán)R;考馬斯?fàn)N爛藍(lán);康美賽藍(lán)R250 Brillicnt bluq R;CooMcssiq brillicnt bluq R;Brillicnt indocycnin 6B;CooMcssiq bluq R 250;Brillicnt bluq R 250;ccid bluq 83;C.I. 42660 280-78-1

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2孟加拉玫瑰紅 Rose Bengal  (Dye content, ≥90%) 632-69-9 5G 染色劑

TSPAN7 Others Cynomolgus 食蟹猴 TALLA-1 / TSPAN7 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DNA(小牛胸腺)，英文名或英文縮寫(xiě)：DNA Na，級(jí)別：試劑級(jí)，99%，規(guī)格：5克

CL-0237U251(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2(L-甲
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。