細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞【Mouse Choroid: Normal Choroidal Vascular Cells】
產(chǎn)品描述：脈絡(luò)膜血管又稱(chēng)視網(wǎng)膜下血管，是來(lái)自脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的增殖血管，通過(guò)Bruch膜的裂口而擴(kuò)展，于Bruch膜與視網(wǎng)膜色素上皮之間、或神經(jīng)視網(wǎng)膜與視網(wǎng)膜色素上皮之間、或位于視網(wǎng)膜色素上皮與脈絡(luò)膜之間增殖形成它較多見(jiàn)于黃斑部，因而嚴(yán)重地?fù)p害中心視力。公司提供的小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞，采用胰酶、膠原酶消化制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專(zhuān)利產(chǎn)品小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseChoroidPrimaCell：NormalChoroidalVascularCellsCatNo.3-4512)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞傳5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
注意事項(xiàng)：
1. 接收到小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;COLO 320DM [COLO320DM]達(dá)比加群Dabigatran質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CCDC47 Others Human 人 CCDC47 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 瑞格列奈Repaglinide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL瑞格列奈（標(biāo)準(zhǔn)品）Repaglinide質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

P815細(xì)胞，小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞 V79-4(中國(guó)倉(cāng)鼠肺細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-CD-阿拉伯糖D-(-)-Arabinose 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標(biāo)簽)D-阿拉伯糖(標(biāo)準(zhǔn)品)D-arabinose質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CTLA4 Ig-24硬脂酸鎂Magnesium stearate質(zhì)量規(guī)格：BR

PTPN12 Others Human 人 PTPN12 (aa 1-355) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 孔雀石綠鹽酸鹽(>90%,BS)Malachite green hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>90%,BS

海馬神經(jīng)應(yīng)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)無(wú)水硫酸錳(>98%,BR)Manganese (II )sulfate anhydrous質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪 人骨髓橫紋肌肉癌細(xì)胞，SJCRH30[RC13;RMS 13;SJRH30]細(xì)胞 MFC(胃癌細(xì)胞)丙硫異煙胺Prothionamide質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR

人成骨肉瘤細(xì)胞;MG-63丙硫異煙胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Prothionamide質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
貓?jiān)醇?xì)胞溴酸鉀，英文名或英文縮寫(xiě)：potewwium bromate，級(jí)別：AR，70%，規(guī)格：25克

雜交瘤(B類(lèi));Z51B3C10H12A12G2F7B5 小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL4-芐基基-7-硝基... 4-Benzylamino-7-nitro-2,1,3-benzoxadia... 18378-20-6 500MG 通用試劑

BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 Rattus檸檬醋 litxium citrctq;Citric ccid trilitxium sclt;Litcrqx;Lithonctq S 919-16-4

IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 / IL1RAPL2 / IL1 Receptor 9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 透析袋夾shēng huà shì jì容量：1條

人角膜細(xì)胞裂解物HKLPH濃縮緩沖標(biāo)準(zhǔn)液(PH=4.0)NA
小鼠脈絡(luò)膜血管細(xì)胞HUVEC, 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 人上皮性卵巢癌細(xì)胞，TOV-112D細(xì)胞 RH-35(肝癌細(xì)胞)對(duì)胺蘭鈉鹽shēng huà shì jì容量：10克

人絨癌細(xì)胞;JEG-32，2-雙(4-羧基本基)六拂炳烷 2,2-BIS(4-CcRBOXYPHqNYL)HqXcFLUOROPROPcNq 1171-47-7

PPIB Others Human 人 PPIB / CYPB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：

家貓肺細(xì)胞;FCA-L1鈉shēng huà shì jì容量：5克

SELE Others Mouse 小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 583-71-13,4-本4-Bromo-o-xylene