小鼠嗅鞘細(xì)胞【MouseBrain:NormalOlfactoryBulbEnsheathingCells】
產(chǎn)品描述：小鼠嗅鞘細(xì)胞是分布于嗅神經(jīng)纖維層，嗅神經(jīng)和嗅黏膜內(nèi)的一種介于雪旺式細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞之間的一種獨(dú)特的膠質(zhì)細(xì)胞。嗅鞘細(xì)胞作為位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)移行區(qū)的一種特殊膠質(zhì)細(xì)胞可以分泌多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子來支持神經(jīng)元的存活和發(fā)育。在神經(jīng)損傷后，嗅鞘細(xì)胞還能抑制炎性因子分泌，促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞軸突再生的作用。公司提供的小鼠嗅鞘細(xì)胞，采用胰酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠嗅鞘細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseBrainPrimaCell:NormalOlfactoryBulbEnsheathingCellsCatNo.3-4456)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠嗅鞘細(xì)胞傳3代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到小鼠嗅鞘細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL潮霉素B(羅氏原裝)Hygromycin B質(zhì)量規(guī)格：羅氏原裝,濃度50mg/ml

COS-6細(xì)胞，非洲綠猴腎細(xì)胞 A375(人類惡性色素瘤) 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1芹菜苷; 芹黃苷Apiin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野決明苷Chrysoeriol 7-O-glucoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，標(biāo)準(zhǔn)品

BC-021(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞;U14-GFP山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Kaempferol-3-O-rutinoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝臟總RNAHMSC-hp NA泮托拉唑鈉一水物Pantoprazole 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
人胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL異槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Isoquercitrin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

BJ細(xì)胞，人皮膚成纖維細(xì)胞系 克柔念珠菌 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B2異茴芹內(nèi)酯Isopimpinellin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

FAM19A4 Protein Human 重組人 FAM19A4 / TAFA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)異類葉升麻苷；異毛蕊花糖苷（標(biāo)準(zhǔn)品）Isoacteoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

MDA-MB-453(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 狗 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 異綠原酸A(標(biāo)準(zhǔn)品)Isochlorogenic acid A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)異綠原酸B(標(biāo)準(zhǔn)品)Isochlorogenic acid B質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D32,4-二羥基嘧啶，英文名或英文縮寫：Uracil，級(jí)別：BR，規(guī)格：15KU

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1 胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解緩沖液) 1mL3-(錄磺酰)本加醋，97% 3-(Chlorosulfonyl)bqnzoic ccid 402-64-3

MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細(xì)胞 HumanBLOCKINGAGENTSAMPLERPACK阻斷試劑包蛋白組學(xué)級(jí)COLDsigma

CHST15 Others Human 人 CHST15 / BRAG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 粘膠質(zhì)，英文名或英文縮寫：Pectin，級(jí)別：試劑級(jí)，98%，規(guī)格：5克

人肺鱗癌細(xì)胞;NCI-H52036431-72-8茶香螺烷 ≥90% (GC)2,6,10,10-Tetrametxyl-1-oxaspiro[4.5]dec-6-ene
小鼠嗅鞘細(xì)胞K-562(人慢性骨髓性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 COLEC10 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2′-脫氧腺苷-5′-單嶙酸shēng huà shì jì容量：RT25克

恒河猴腎細(xì)胞;MMK21-氧基 1-Mqthoxyncphclqnq 16-69-2

CDH5 Others Rat 大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 腸道菌增菌肉湯shēng huà shì jì容量：RT10克

胰島β細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)甲硝噠唑，英文名或英文縮寫：Metronidazole，級(jí)別：BR，規(guī)格：500u

CHMAS細(xì)胞，人肥大細(xì)胞白血病細(xì)胞 小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞,CT26.WT[CT26WT]細(xì)胞 支氣管上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物BEpiCGS120-61-6對(duì)本二二;1,4-本二二Dimetxyl p-phthalate;metxyl p-phthalate;7mt
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。