凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

參數(shù)規(guī)格：
小鼠卵巢上皮細胞【MouseOvarian：NormalOvarianEpithelialCells】
產品描述：小鼠卵巢上皮細胞分離自正常小鼠卵巢組織，卵巢上皮細胞主要功能：（1）上皮細胞能分泌激素，刺激卵細胞分化成熟。（2）細胞能分泌炎癥介質，參與炎癥反應。公司提供的小鼠卵巢上皮細胞，采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產品小鼠卵巢上皮細胞培養(yǎng)試劑盒MouseOvarianPrimaCell:NormalOvarianEpithelialCellsCatNo.3-4330)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下，小鼠卵巢上皮細胞原代細胞傳5代以上仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。

實驗要點及說明 ：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。      
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液，注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人胚腎細胞;293 [HEK-293]Fmoc-L-beta-高谷氨酸6-叔丁酯Fmoc-L-β-Homoglutamic acid 6-tert-butyl ester質量規(guī)格：0.98

KNG1 Others Human 人 KNG1 / BDK / Kininogen-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 高精氨酸H-HomoArg-OH質量規(guī)格：98%，BR，L型

腦靜脈血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)BOC-D-纈氨酸Boc-D-Val-OH質量規(guī)格：>98%,BR

FCGR2B Others Human 人 CD32b / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照) BOC-L-苯甘氨酸Boc-Phg-OH質量規(guī)格：0.98

NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細胞BOC-L-高苯丙氨酸BOC-L-Homophenylalanine質量規(guī)格：>98%,BR
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD)碳酸鋇(>99%,BR)Barium carbonate質量規(guī)格：>99%,BR

MX-1(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 腮腺細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)苯甲酰胺(>98%,BR)Benzamide質量規(guī)格：>98%,BR

小氣道平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)比布里希猩紅(>90%,BS)Biebrich scarlet質量規(guī)格：>90%,BS

IL9 Others Human 人 IL-9 / Ierleukin-9 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸鈣；檸檬酸鈣四水Calcium , tetrahydrate質量規(guī)格：>98%,BR

大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)硫酸銫(分子生物學級)Cesium sulfate質量規(guī)格：>99.5%,分子生物學級
人絨毛間葉成纖維細胞總RNAHVMF NAGUANIDINExy7noCHLORIDE鹽酸胍技術級白色至微黃色顆粒結晶粉末RTsigma

EREG Others Human 人 Epiregulin / EREG 人細胞裂解液 (陽性對照) 氘代炳同-D6 cCqTONq-D6 666-2-4

Eca-109 人食管癌細胞葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex LH-20 Null 25G 分離試劑

CL-0393NCI-H209(人小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2HISTOCHOICETISSUEFIXATIVEWITHOUTALCOHOL組織固定劑組織學級微黃無混濁液體RTsigma

MA, 小鼠星形膠質細胞(糖原III)
小鼠卵巢上皮細胞人角膜上皮細胞 (HcorF)( 5×105 )5-BrdC5-溴脫氧胞嘧啶核苷5克高，95%

CM-M090小鼠前脂肪細胞完全培養(yǎng)基100mL2-基務二晴 2-MqTHYLGLUTcROnitnILq 4223-6-

小鼠腦瘤細胞;BC3H1 小鼠氣管和支氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL3,5-Diiodo-L-tyrosinedihydrate3,5-二酪酸10克BR，98%

人間充質干細胞-脂肪 HumanSEPARATINGGEL,4XBUFFER蛋白分離膠緩沖液,4 X蛋白組學級500MLRT

RLN1 Others Human 人 RLN1 / Relaxin-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 4612-26-41，4-本二硼酸1,4-pxenylenepisboronic acid
收到小鼠卵巢上皮細胞如何處理？
1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質量的穩(wěn)定。在公司生物技術部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。