成年小鼠心肌細(xì)胞【MouseCardiac:NormalMyocardialCells】
產(chǎn)品描述：心肌細(xì)胞構(gòu)成心壁的主要成分。為心臟博動(dòng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。心肌細(xì)胞根據(jù)其生理功能可分為兩類,即工作性心肌細(xì)胞和傳導(dǎo)性心肌細(xì)胞。其中工作性心肌細(xì)胞構(gòu)成心房肌和心室肌,是心壁的主要組成部分,具有興奮、傳導(dǎo)和收縮的功能;而自律性心肌細(xì)胞組成心臟的傳導(dǎo)系統(tǒng),包括竇房結(jié)、結(jié)間束、房室交界、左右束支和普肯耶纖維網(wǎng)。它們除有興奮、傳導(dǎo)的功能外,還有自律性,即不受神經(jīng)支配與體液的影響,有產(chǎn)生周期性興奮的能力。竇房結(jié)興奮,將沖動(dòng)擴(kuò)布到心肌,引起心肌的收縮,從而產(chǎn)生心肌細(xì)胞的生物電現(xiàn)象。所以心肌細(xì)胞具有興奮性、自律性、傳導(dǎo)性和收縮性四種生理特性。公司提供的小鼠心肌細(xì)胞（乳鼠），采用膠原酶消化制備而來(lái)。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品成年小鼠心肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseCardiacPrimaCell:NormalMyocardialCellsCatNo.3-4247)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，成年小鼠心肌細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到成年小鼠心肌細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人絨癌細(xì)胞;JEG-34-叔丁基杯[4]芳烴-O,O',O'',O'''-四乙酸四乙酯(>96.0%(HPLC))Tetraethyl 4-tert-Butylcalix[4]arene-O,O',O'',O'''-tetraacetate質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(HPLC)

PPIB Others Human 人 PPIB / CYPB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-叔丁基硫雜杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylthiacalix[4]arene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

家貓肺細(xì)胞;FCA-L14-對(duì)乙酰氨基酚硫酸鉀鹽4-Acetaminophen Sulfate Potassium Salt

SELE Others Mouse 小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-對(duì)乙酰氨基酚硫酸鹽-d34-Acetaminophen-d3 Sulfate

CL-0101Hela(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×23-(N-乙酰-L-半胱氨酸-S-基)對(duì)乙酰氨基酚鈉鹽3-(N-Acetyl-L-cystein-S-yl) Acetaminophen  Salt
人葡萄膜色素細(xì)胞;UM四甲基錫(>96.0%(GC))Tetramethyltin質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC)

THPO Others Cynomolgus 食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 二氯二茂鋯(>97.0%(T))Zirconocene Dichloride質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)

食管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Chirabite-AR[用于核磁共振]Chirabite-AR質(zhì)量規(guī)格：用于核磁共振

DMP1 Others Human 人 DMP1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)鐠(III)(＞98%(T))Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)praseodymium(III) 質(zhì)量規(guī)格：＞98%(T)

NRK-52E 大鼠腎細(xì)胞三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)銪(III)(＞95%(T))Tris(2,2,6,6-tetramethyl-3,5-heptanedionato)europium(III)質(zhì)量規(guī)格：＞95%(T)
腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基MCM-prf4-(三氟甲基)煙酰胺4-(Trifluoromethyl)nicotinamide

CDC42BPB Others Human 人 CDC42BPB 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 1-甲基-煙酰胺化物1-Methyl-nicotinamide Iodide

人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞;WPMY-1煙酰胺-2,4,5,6-d4Nicotinamide-2,4,5,6-d4

P388D1細(xì)胞，瘤細(xì)胞 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞,HCT-8細(xì)胞 CM-H020人胰島β細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-(羥甲基)煙酰胺N-(Hydroxymethyl)nicotinamide

大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6β-萘酚,異萘酚質(zhì)量規(guī)格：AR2-Naphthol
成年小鼠心肌細(xì)胞DDR1 Others Rat 大鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ChloramineTtrihydrate錄亞明T100毫克超，99%

人羊膜細(xì)胞;HA單炳同-D-葡萄糖 1,2-O-Isopropylidqnq-D-glucofurcnosq 18249-40-1

SW-13細(xì)胞，人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 豬細(xì)胞系(ST),ST細(xì)胞 CL-0422RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2言醋摸西沙星 Moxifloxccin xy7nochloridq 18686-86-8

D283 Med(人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×25-肌苷二嶙酸三鈉鹽50克RT

hMo-PB-c single donor 人類外周血細(xì)胞來(lái)源的單核細(xì)胞， 10 million 人心臟成纖維細(xì)胞-心室HCF-av(Bis-Acrylamide雙酰胺)
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。