操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞【MouseGastric:NormalGastricMucosalEpithelialCells】
產(chǎn)品描述：胃粘膜上皮細(xì)胞具有很高的更新速度，各種上皮細(xì)胞具有不同的代謝周期，處于一種動(dòng)態(tài)的、精致的平衡之中。胃粘膜由許多胃單位構(gòu)成的，每個(gè)胃單位由頂細(xì)胞、壁細(xì)胞、主細(xì)胞、頸粘液細(xì)胞、多能干細(xì)胞以及少量的內(nèi)分等多種上皮細(xì)胞組成,其中頂細(xì)胞、壁細(xì)胞、主細(xì)胞是胃粘膜最主要的三種細(xì)胞。各種上皮細(xì)胞均來源于峽部的多能干細(xì)胞，每種細(xì)胞具有不同的功能和更新速率。細(xì)胞分化、增殖和凋亡的改變直接影響到胃粘膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定,是導(dǎo)致胃相關(guān)疾病發(fā)生的原因。公司提供的小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞，均來自新鮮組織。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseGastricPrimaCell:NormalGastricMucosalEpithelialCellsCatNo.3-4141)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人細(xì)胞;Hela S3 [HeLaS3] 大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL5-乙酰水楊酸5-Acetylsalicylic acid

AtT20 小鼠垂體瘤細(xì)胞N-芐基甘氨酸N-Benzylglycine質(zhì)量規(guī)格：>98.0%,BR

VSIG4 Others Human 人 VSIG4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 扎那米韋Zanamivir質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,一水物

人癌細(xì)胞;MDA-MB-435S扎那米韋(標(biāo)準(zhǔn)品)Zanamivir質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 去氧氟尿苷/5'-脫氧-5-氟尿嘧啶核苷Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
96-C細(xì)胞，低轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,PC-3細(xì)胞 人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞總RNAHBdSF NA替卡格雷Ticagrelor質(zhì)量規(guī)格：>99%,II晶型

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7替卡格雷(標(biāo)準(zhǔn)品)Ticagrelor質(zhì)量規(guī)格：>99%,光學(xué)度>97%,標(biāo)準(zhǔn)品

AHSG Others Mouse 小鼠 Fetuin-A / AHSG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸雷莫司瓊Ramosetron HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076鹽酸司維拉姆Sevelamer HCl質(zhì)量規(guī)格：BR

IL5 Others Canine 狗 IL5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 碳酸司維拉姆Sevelamer carbonate質(zhì)量規(guī)格：BR;Binding of  Phosphate 4.0~7.0mmo1/g
Hut-78細(xì)胞，皮膚T細(xì)胞瘤 人血管平滑肌,T/G細(xì)胞 人低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞;OCM-1ASulfo NHS;N-羥基硫代琥珀質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRsulfo-NHS

A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2亞甲蘭,亞甲基藍(lán)質(zhì)量規(guī)格：BSMethylene Blue

PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸沃尼妙林質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRValnemulin HCl

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S51酸泰樂菌素質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRTylosin phosphate

DKKL1 Others Human 人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 白鮮堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Dictamnine
小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞大鼠肝細(xì)胞;BRL 3A羧甲基葡聚糖凝膠C-25200u保存：-20℃

人心肌細(xì)胞 (HCM) (1×106 )2,4-二錄-5-氧基本安 2,4-Dichloro-5-mqthoxycnilinq 98446-49-

CL-0003293A (人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2微量可調(diào)移液器P100025克

小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2 小鼠支氣管成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL焦鉀shēng huà shì jì容量：500克

人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Human83949-45-52-酚-3,7-二磺酸二鈉Diwo7ium 2-naphthol-3,7-disulfonate
注意事項(xiàng)：
1. 接收到小鼠胃粘膜上皮細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。