小鼠小腸粘膜上皮細胞【MouseIntestine:NormalSmallIntestinalMucosaEpithelialCells】
產(chǎn)品描述：小腸粘膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此，IECs除有吸收、分泌和等重要生理功能之外，在粘膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。小腸上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在粘膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定粘膜免疫反應的發(fā)生、性質(zhì)和強度。公司提供的小鼠小腸粘膜上皮細胞，均來自新鮮組織。細胞的培養(yǎng)采用公司產(chǎn)品小鼠小腸粘膜上皮細胞培養(yǎng)試劑盒(MouseIntestinePrimaCell:NormalSmallIntestinalMucosaEpithelialCellsCatNo.3-4134)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞（如脂肪細胞、纖維細胞等）的污染，同時質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，小鼠小腸粘膜上皮細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：
1. 接收到小鼠小腸粘膜上皮細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精（建議配置75%的酒精的水是過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在的產(chǎn)品：
人細胞;Hela S3 [HeLaS3]乙二醇苯(standard for GC,≥99.5%(GC))Ethylene glycol monophenyl ether質(zhì)量規(guī)格：standard for GC,≥99.5%(GC)

ICAM1 Others Mouse 小鼠 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 (陽性對照) O-去甲基美托洛爾O-Desmethyl Metoprolol

人成骨肉瘤細胞;MG-63草酸脫氫氨氯地平Dehydro Amlodipine Oxalate

IL12A&IL27B Others Human 人 IL12A & IL27B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) (R)-氨氯地平(R)-Amlodipine

人臍帶血單個核細胞阿瑞匹坦-標記d4Aprepitant - Labeled d4
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW 264.7 [RAW264.7替卡西林(標準品)Ticarcillin di salt質(zhì)量規(guī)格：含量測定，二鈉鹽

FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 (陽性對照) RGD肽Arg-Gly-Asp 質(zhì)量規(guī)格：>97%,integrin抑制劑

小鼠子細胞;U14肝素鋰Heparin lithium質(zhì)量規(guī)格：>150IU/MG,BR

IL18R1 Others Canine 狗 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 促胰液素;胰泌素Secretin Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜癌細胞系麝香草酚Thymol質(zhì)量規(guī)格：AR
SRSV/3T3細胞，SRSV轉(zhuǎn)化的3T3細胞 人胰腺癌細胞,SW1990細胞 CM-M032小鼠腸靜脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL尿酸，英文名或英文縮寫：Tricyanic acid，級別：AR，98%，規(guī)格：25克

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12]2-雙環(huán)已基膦-2 ,6-二異炳氧基聯(lián)本 95% 2-DICYCLOHqXYLPHOSPHINO-2',6'-DI-I-PROPOXY-1,1'-BIPHqNYL 787618--8

BSG Others Human 人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照) 偶氮錄膦mA，英文名或英文縮寫：CPA-mA，級別：色固，規(guī)格：100克

人少突膠質(zhì)前體細胞裂解物HOPCL交替砂，英文名或英文縮寫：Permutit，級別：CP，14.5%，規(guī)格：100克

IL12A & IL12B Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照) 120-94-5N-甲基 97%1-metxylpyrrolidine
小鼠小腸粘膜上皮細胞人主動脈平滑肌細胞 (HASMC)( 5×105 )Dopaminexy7nochloride3-羥基酪胺鹽酸鹽5克特，98.5%

CL-001195-D(人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞)5×106cells/瓶×2熊果苷;熊果酚苷;熊葡萄糖葉速;隊本二酚葡糖苷;隊本醌配葡萄糖;熊果葉苷 crbutin;xy7noinoneonq glucosq;xy7noinoneonq-β-D-glucopyrcnosidq;crbutosidq 497-76-7

小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長分泌);AtT-20 小鼠支氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL4-羥基shēng huà shì jì容量：0.25毫升

人臍靜脈平滑肌細胞 HumanpHSTANDARD,7.0pH標準液7.0生物技術(shù)級

CSF1R Others Mouse 小鼠 CSF1R / M-CSFR / CD115 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-AT 5g/10g/25g/100g原裝 Sigma A8056
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。