操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞【MouseAirway:NormalBronchialSmoothMuscleCells】
產(chǎn)品描述：小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞分離自正常小鼠支氣管平滑肌，呈長(zhǎng)紡錘形纖維狀分布。該細(xì)胞在維持氣道張力維持支氣管形態(tài)中起重要作用，氣道平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和調(diào)節(jié)機(jī)制是實(shí)現(xiàn)氣管正常生理功能的基礎(chǔ)。公司提供的小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞，均來(lái)自新鮮組織。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專(zhuān)利產(chǎn)品小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseAirwayPrimaCell:NormalBronchialSmoothMuscleCellsCatNo.3-4092)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
人張氏肝細(xì)胞;Chang liverO-4-硝基芐基羥胺鹽酸鹽(>99.0%(HPLC),用于高效液相色譜標(biāo)記)O-4-Nitrobenzylhydroxylamine Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC),用于高效液相色譜標(biāo)記

JAM2 Others Mouse 小鼠 JAM2 / CD322 / VE-JAM 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 7-乙酰氧基-4-溴甲基(>98.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo))7-Acetoxy-4-bromomethylcoumarin質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo)記

肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基AEpiCM1-萘乙醇(>98%,BR)1-Naphthalene ethanol質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

MET Others Canine 狗 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 乙酸-1-萘酯(>98%,BR)1-Naphthyl acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

GPL1 豚鼠肺成纖維樣細(xì)胞二十八烷醇(>98%,BR)1-Octacosanol質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
LTEP-a-2(人肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2檸檬酸鋰四水(>98%,BR)Lithium , tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

Promocell C-21160 Airway Epithelial Cell GrowthMedium KIT,呼吸道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml4-甲基傘形酮酰-beta-D-吡喃糖苷MU-Gal質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級(jí)

人支氣管成纖維細(xì)胞HBF4-甲基傘形酮酰-Β-D-吡喃葡糖酸苷MU-GLU質(zhì)量規(guī)格：>99%，分子生物學(xué)級(jí)

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Texas/05/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4-甲基傘花基1酸鈉三水MUP, di salt, trihydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%，分子生物學(xué)級(jí)

J774A.1 小鼠巨噬細(xì)胞1,4-雙(5-苯基-2-噁唑基)苯(>98%,Scint Grade)POPOP質(zhì)量規(guī)格：>98%
CL-0340GH3(大鼠垂體瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×27-磺酰胺基-N-羥甲基氫氯噻嗪7-Sulfonamido-N-hydroxymethyl Hydrochlorothiazide

SF9, 昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞 人癌細(xì)胞，MCF7B細(xì)胞 hFOB 1.19(人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞)5-氯氫氯噻嗪5-Chloro Hydrochlorothiazide

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy氫氯噻嗪雜質(zhì)CHydrochlorothiazide Impurity C

CHI3L1 Others Human 人 CHI3L1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) -d6Prednisolone-d6

人正常肺上皮細(xì)胞;BEAS-2B9-甲基-d3-腺嘌呤9-Methyl-d3 Adenine
小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞RIOK1 Others Human 人 RIOK1 / RIO kinase 1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 鈣鐵石，英文名或英文縮寫(xiě)：Kieselguhr，級(jí)別：BR，97%，規(guī)格：25克

少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基OM加醋銨;蟻醋銨 cMMoniuM forMctq 240-69-

非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1 人二倍體胚肺細(xì)胞，WI-38細(xì)胞 SHG-44(膠質(zhì)瘤細(xì)胞)還原輔酶Ⅰ抑制劑，英文名或英文縮寫(xiě)：NADH Inhibitor，級(jí)別：高，60u/mg，規(guī)格：5克

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0920本酸鉀鹽，英文名或英文縮寫(xiě)：potewwium benzoate，級(jí)別：CP，規(guī)格：10克

CD36 Others Mouse 小鼠 CD36 / GP3B / SCARB3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Bis-Acrylamide 25g/100g Amresco 0172
注意事項(xiàng)：
1. 接收到小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。