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小鼠肺大動脈內皮細胞
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代理商,生產商,
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公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司生物技術部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
參數(shù)規(guī)格:
小鼠肺大動脈內皮細胞【MouseLung:NormalArteryEndothelialCells】
產品描述:小鼠肺大動脈內皮細胞分離自正常小鼠肺組織,呈單層多角形鋪路石狀分布。該細胞在維持血管內外的動態(tài)平衡,合成和分泌細胞因子和介質,維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。公司提供的小鼠肺大動脈內皮細胞,均來自新鮮組織。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產品小鼠肺大動脈內皮細胞培養(yǎng)試劑盒(MouseLungPrimaCell:NormalArteryEndothelialCellsCatNo.3-4050)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞、纖維細胞等)的污染,同時保證質量的穩(wěn)定。在公司技術部標準的操作流程下,小鼠肺大動脈內皮細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調節(jié)特定基因的遺傳功能。
產品名稱 | 小鼠肺大動脈內皮細胞 |
英文名稱 | MouseLung:NormalArteryEndothelialCells |
貨號 | GOY-Y6375 |
凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明 :
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
收到小鼠肺大動脈內皮細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S53-羥基黃酮3-Hydroxyflavone;Flavonol質量規(guī)格:≥98%,BR
IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / DER4 人細胞裂解液 (陽性對照) 銀杏酸C17:1Ginkgolic Acid C17:1質量規(guī)格:HPLC≥80%,美國進口
恒河猴肺細胞;RM-L12-溴代萘2-Bromonaphthalene質量規(guī)格:>98%
8. 骨骼肌細胞系統(tǒng)2-氯乙酰胺(>98.5%,BR)2-Chloroacetamide質量規(guī)格:>98.5%,BR
CL-0252A2(人腺樣囊性癌細胞)5×106cells/瓶×22-氯乙基磺酸鈉(>98%,BR)2-Chloroethanesulfonic acid salt質量規(guī)格:>98%,BR
RL95-2, 人子宮內膜腺癌細胞系氫化大豆卵1脂;氫化卵1脂HSPC;Lecithins Hydrogenated質量規(guī)格:>95%,BR
人急性單核細胞白血病細胞;THP-1 大鼠管內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL鏈霉素(標準品)Streptomycin質量規(guī)格:效價測定
神經膠質細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Tenovin-1TENOVIN-1質量規(guī)格:>98%
NA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/USSR/90/1977) 神經氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 新霉素(標準品)neomycin質量規(guī)格:效價測定
KM小鼠未分化神經膠質瘤瘤株;B22桿菌肽(標準品)Bacitracin質量規(guī)格:效價測定
人纖維環(huán)細胞HAFC1-溴-4-壬基苯(>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)1-Bromo-4-nonylbenzene
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-溴-4-戊苯(>90.0%(GC))質量規(guī)格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-pentylbenzene
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-61-溴-4-己苯(>90.0%(GC))質量規(guī)格:>90.0%(GC)1-Bromo-4-hexylbenzene
大鼠骨肉瘤細胞;UMR-106 肺腺癌細胞,LTEP-a-2細胞 MSCS細胞,猴的骨髓間充質干細胞1-溴-4-庚苯(含穩(wěn)定劑銅屑)(>95.0%(GC))質量規(guī)格:>95.0%(GC)1-Bromo-4-heptylbenzene (stabilized with Copper chip)
PANC-1, 人胰腺癌細胞 Human1-溴-4-正辛基苯(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)1-Bromo-4-n-octylbenzene
小鼠肺大動脈內皮細胞XCL1 Others Mouse 小鼠 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 神經酸,英文名或英文縮寫:Nervonic acid,級別:CP,98%,規(guī)格:100克
CM-H078人心肌成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL吩嗪乙基鹽 Phen ethosulfate,≥95% 10510-77-7 1G 通用試劑
lovo, 人結腸癌細胞 腹水瘤,SAC-IIB2細胞 NCI-H1563 [H1563](人胚肺細胞)雙三拂烷磺酰亞安 litxium bis(trifluoromqthcnqsulphonyl)imidq 90076-62-6
小鼠結腸癌細胞;CT26.WT [CT26WT]2′-脫氧尿苷-5′-三嶙酸三鈉鹽1克RT
GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV Glycoprotein B 人細胞裂解液 (陽性對照)
