人脈絡(luò)膜血管平滑肌細(xì)胞【HumanEyes:NormalChoroidalVascularSmoothMuscleCells】
產(chǎn)品描述：人脈絡(luò)膜血管平滑肌細(xì)胞分離自正常人脈絡(luò)膜血管組織，脈絡(luò)膜血管又稱視網(wǎng)膜下血管，是來(lái)自脈絡(luò)膜毛細(xì)血管的增殖血管，通過(guò)Bruch膜的裂口而擴(kuò)展，于Bruch膜與視網(wǎng)膜色素上皮之間、或神經(jīng)視網(wǎng)膜與視網(wǎng)膜色素上皮之間、或位于視網(wǎng)膜色素上皮與脈絡(luò)膜之間增殖形成它較多見(jiàn)于黃斑部，因而嚴(yán)重地?fù)p害中心視力。本癥極為常見(jiàn)，目前已成為致盲的主要原因之一，早期發(fā)現(xiàn)和及時(shí)處理，在臨床上具有十分重要的意義。公司提供的人脈絡(luò)膜血管平滑肌細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)人脈絡(luò)膜血管平滑肌細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人脈絡(luò)膜血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanEyesPrimaCell:NormalChoroidalVascularSmoothMuscleCellsCatNo.3-0554)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人脈絡(luò)膜血管細(xì)胞可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到人脈絡(luò)膜血管平滑肌細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
小鼠色素瘤細(xì)胞;B16L-天冬氨酸二甲酯鹽酸鹽L-Aspartic acid dimethyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA 肝癌細(xì)胞，Hepa 1-6細(xì)胞 M145細(xì)胞，猴腎C細(xì)胞CBZ-D-纈氨酸N-Cbz-D-valine質(zhì)量規(guī)格：0.98

人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17Z-Arg(Mtr)-OH·CHAZ-Arg(Mtr)-OH·CHA質(zhì)量規(guī)格：0.98

JAM3 Others Mouse 小鼠 JAM3 / JAM-C 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) CBZ-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽H-Lys(Z)-OMe hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%

腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)N-CBZ-D-丙氨酸Z-D-Ala-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
原代成纖維細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝：1ml腺苷 5'-1酰硫酸 鈉鹽Adenosine 5'-phosphosulfate  salt

人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29 大鼠子宮平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN6-苯甲基-5’-乙基甲酰胺基腺苷N6-Benzyl-5'-ethylcarboxamido Adenosine

FO 小鼠骨髓瘤細(xì)胞P1,P5-Di（腺苷-5'-)五1酸鹽，五鈉鹽P1,P5-Di(adenosine-5') pentaphosphate penta salt

ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) P1,P5-Di(腺苷-5'-)五1酸鹽，五銨鹽e pentaammonium saltP1,P5-Di(adenosine-5') pentaphosphate pentaammonium salt

小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVAN6-苯甲基腺苷N6-Benzyl Adenosine
腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)CAPS; 3-(環(huán)已胺)丙磺酸質(zhì)量規(guī)格：>99%CAPS

STXBP1 Others Human 人 STXBP1 / UNC18A 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 巴豆苷（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Crotonoside

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B6巴西蘇木素（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Brazilin

T/G HA-VSMC細(xì)胞，人主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞 人胚肝細(xì)胞正常,QSG-7701細(xì)胞 CL-0064CoC1(人卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2菝葜皂苷元（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Sarsasapogenin

人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株;7WML6.0阿托伐他汀叔丁基酯Atorvastatin tert-Butyl Ester
人脈絡(luò)膜血管平滑肌細(xì)胞小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF-mt)(5×105) Hep G2, 人肝癌細(xì)胞系 Human4-xy7noxybipxenyl對(duì)本基酚500克CP，95%

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-3C32-基本并咪坐;2-基間二氮茚 2-MqthylbqnziMidczolq;2-Mqthyl-1,3-bqnzodiczolq 612-12-6

GUCA1A Others Human 人 GCAP1 / GUCA1A 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2'-Fluoroacetopxenone鄰扶本以酮500克CP，98%

表皮色素細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)NEXTGELRUNNINGBUFFER20XNEXT 膠 電泳緩沖液蛋白組學(xué)級(jí)500MLRT

人星形膠質(zhì)細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞，NCI-H1869[H1869]細(xì)胞 YAC-1(瘤細(xì)胞)1，4-二(2-)NA
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。