操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞【TheHumanBrain:NormalBrainArteryEndothelialCells】
產(chǎn)品描述：人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自正常人腦動(dòng)脈血管組織，其主要功能：（1）維持血管內(nèi)外的動(dòng)態(tài)平衡。（2）合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)。（3）維持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。公司提供的人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專(zhuān)利產(chǎn)品人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(TheHumanBrainPrimaCell:NormalBrainArteryEndothelialCellsCatNo.3-0470)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

以下是公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
新生牛眼晶體上皮細(xì)胞;NBLE苯駢三氮唑（BTA,1,2,3-苯駢三氮唑)1H-Benzotriazole質(zhì)量規(guī)格：AR,分析

NCI-H2087細(xì)胞，人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝的NIH3T3細(xì)胞,PA317細(xì)胞 CM-R095大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸倍他司汀Betahistine Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

RL95-2(人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸倍他司?。?biāo)準(zhǔn)品）Betahistine Dihydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Gibco 10725018 Keratinocyte-SFM (1X), Liquid with L-Glutamine, without Calcium Chloride 500 ml甲磺酸倍他司汀Betahistine Dimesilate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞RNAHSkMSC miRNA5 μg胰島素(豬)INSULIN質(zhì)量規(guī)格：BR,來(lái)源豬胰臟
人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL楊梅苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Myricetrin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PA317細(xì)胞，逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細(xì)胞 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1楊芽黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)Tectochrysin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CCL17 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 (His 標(biāo)簽)洋川芎內(nèi)酯A（標(biāo)準(zhǔn)品）Senkyunolide A質(zhì)量規(guī)格：鑒別用，標(biāo)準(zhǔn)品

NG108-15(小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 FAM20B / Gxk1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 氧化槐果堿（標(biāo)準(zhǔn)品）Oxysophocarpine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

雜交瘤(B類(lèi));Z51B3C10H12A12G2F7E7BelinostatBelinostat (PXD101)質(zhì)量規(guī)格：>98%
MSR1 Others Rat 大鼠 MSR1 / SCARA1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 磺，英文名或英文縮寫(xiě)：Sulfamer，級(jí)別：BR，95-100%，規(guī)格：100毫升

腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)3，3-二安基聯(lián)本安言醋鹽 3,3',4,4'-Biphqnyltqtrcminq tqtrcxy7nochloridq

3T6swiss細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人癌細(xì)胞,M453細(xì)胞 谷胱甘肽過(guò)氧化物酶分析試劑盒GPXβ-蛋白組學(xué)級(jí)透明無(wú)色液體RT不sigma

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1脫葉靈，英文名或英文縮寫(xiě)：TDZ，級(jí)別：高，99%，規(guī)格：50毫克

IL13RA2 Others Human 人 IL13RA2 / IL13R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 7778-80-5鉀potewwium sulfate;Tartarus vitriolatus;Salt of leMery
人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞ALCAM Others Human 人 ALCAM / CD166 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-組酸shēng huà shì jì容量：RT，避光1克

肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)2′-脫氧鳥(niǎo)苷-5′-... dGTP，3Na;2′-Deoxguanosine-5′-triph... 93919-41-6 10MG 通用試劑

FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三溴化六亞基四安 97% HqXcMqTHYLqNqTqTRcMINq, COMPOUND WITH xy7noGqN TRIBROMIDq (1:1) 14961-40-2

AtT20 小鼠垂體瘤細(xì)胞X-galX-gal超級(jí)白色粉末FROZENsigma

大鼠肺細(xì)胞;WL1104-87-04-甲基;對(duì)甲基4-metxyl;p-Toluylaldehyde;p-Tolylaldehyde
注意事項(xiàng)：
1. 接收到人腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。