人卵巢上皮細(xì)胞【HumanOvary:NormalOvarianEpithelialCells】
產(chǎn)品描述：人卵巢上皮細(xì)胞分離自正常人卵巢組織，卵巢上皮細(xì)胞主要功能：（1）上皮細(xì)胞能分泌激素，刺激卵細(xì)胞分化成熟。（2）細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì)，參與炎癥反應(yīng)。公司提供的人卵巢上皮細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)人卵巢上皮細(xì)胞的組織采集于地方醫(yī)院，組織的采集根據(jù)公司批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(HumanOvarianPrimaCell:NormalOvarianEpithelialCellsCatNo.3-0393)來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，人卵巢上皮細(xì)胞傳5代以上仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，公司提供的人源原代細(xì)胞均來(lái)自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來(lái)優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到人卵巢上皮細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5 小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL醋甲唑胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Methazolamide質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品

BRL 3A, 大鼠肝正常細(xì)胞 Rattus齊拉西酮Ziprasidone質(zhì)量規(guī)格：含量≥99%

IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 / IL1RAPL2 / IL1 Receptor 9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 塞曲司特/西拉達(dá)司/塞拉司特Seratrodast質(zhì)量規(guī)格：含量≥98.0%

人角膜細(xì)胞裂解物HKL美托拉宗Metolazone質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR

CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 美托拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品)Metolazone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品
A431細(xì)胞，表皮癌細(xì)胞系 人T細(xì)胞系,H9細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3銀杏內(nèi)酯C(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginkgolide C質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2銀杏內(nèi)酯J(標(biāo)準(zhǔn)品)Ginkgolide J質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

CST5 Others Human 人 CST5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 隱丹參酮(標(biāo)準(zhǔn)品)Cryptotanshinone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B隱丹參酮Cryptotanshinone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥97%，BR

HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ?；蛆Z去氧膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Taurochenodeoxycholic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
LTEP-a-2細(xì)胞，肺腺癌細(xì)胞 人喉表皮樣癌細(xì)胞,HEp-2細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C55-胞苷二嶙酸單鈉鹽shēng huà shì jì容量：100克

雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8堿藍(lán)6B Alkali blue 6B 1324-80-7 10G 通用試劑

INSR Others Human 人 Insulin Receptor / INSR / CD220 ( Short Isoform ) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-2,3-二安基炳醋言醋鹽 H-D-DcP-OH HCL 6018-26-0

人葡萄膜色素細(xì)胞;UMpH10.0STANDARDpH標(biāo)準(zhǔn)液10.0生物技術(shù)級(jí)藍(lán)色無(wú)混濁溶液RTsigma

人氣管上皮細(xì)胞(HTEpiC)(5×105 )67-68-5二甲亞砜 99.7+%Dimetxyl sulfoxide
人卵巢上皮細(xì)胞猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-N6-BenzoyladenineN-(5H-嘌呤-6-基)本甲先胺25克BR，98%

COL9A1 Others Human 人 COL9A1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 10-酰葉醋 10-ForMylfolic ccid 134-02-4

髓母細(xì)胞瘤組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml棕櫚醋酯 Mqthyl PclMitctq 11-39-0

SW13細(xì)胞，人腎上腺皮質(zhì)瘤 人癌細(xì)胞,BT-549細(xì)胞 抗真菌溶液AMSL-NorvalineL-2-基戊酸1克BR，99%

SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-734598-49-75-溴-1-茚酮5-Bromoindanone
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。