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主營產(chǎn)品: 從事生物科技, 醫(yī)藥科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)咨詢, 技術(shù)服務(wù), 技術(shù)開發(fā), 技術(shù)轉(zhuǎn)讓, 商務(wù)咨詢(除經(jīng)紀), 電子商務(wù)(不得從事增值電信, 金融業(yè)務(wù)), 投資管理, 建設(shè)工程(憑許可資質(zhì)經(jīng)營), 化工原料及產(chǎn)品(除危險化學(xué)品, 監(jiān)控化學(xué)品, 煙花爆竹, 民用爆炸物品, 易制毒化學(xué)品), 實驗室設(shè)備, 測量器材, 酒店設(shè)備, 環(huán)保設(shè)備, 鐘表, 服裝鞋帽, 頗具箱包, 一類醫(yī)療器械, 電子產(chǎn)品, 陶瓷制品的銷售.
人睪丸支持細胞
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凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
參數(shù)規(guī)格:
人睪丸支持細胞【HumanTestis:NormalSertoliCells】
產(chǎn)品描述:睪丸支持細胞,呈不規(guī)則的高錐體形,細胞基部附著在基膜上,頂部伸至曲精小管腔面又稱支持細胞(suportingcell)。公司提供的人睪丸支持細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)人睪丸支持細胞的組織采集于地方醫(yī)院,組織的采集根據(jù)公司批準的方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品人睪丸支持細胞培養(yǎng)試劑盒(HumanTestisPrimaCell:NormalSertoliCellsCatNo.3-0386)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞、纖維細胞等)的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,人睪丸支持細胞傳12代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
產(chǎn)品名稱 | 人睪丸支持細胞 |
英文名稱 | HumanTestis:NormalSertoliCells |
貨號 | GOY-Y6338 |
實驗要點及說明 :
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184苯并[g,h,i]芘(標準品)Benzo[ghi]perylene質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
BHK細胞,幼倉鼠腎細胞 人胰腺癌細胞,CFPAC-1細胞 CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL1-十八1(標準品)1-Octadecene質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)
大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J辛胺(標準品)n-Octylamine質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)
RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人細胞裂解液 (陽性對照) 十八烷(標準品)Octadecane質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)
人骨骼肌成肌細胞cDNAHSkMM cDNA2-辛酮(標準品)2-Octanone質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)
原代神經(jīng)元細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml鹽酸伊立替康-d10Irinotecan-d10 Hydrochloride
人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT-8 [HRT-18] 大鼠卵巢顆粒細胞完全培養(yǎng)基 100mL硫酸卡那霉素Kanamycin sulfate
EMT-6 小鼠癌卡那霉素AKanamycin A
ERBB2 Others Rhesus 恒河猴 ErbB2 / HER2 人細胞裂解液 (陽性對照) 卡那霉素B硫酸鹽Kanamycin B sulfate
雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6卡那霉素A硫酸鹽Kanamycin A Sulfate
人臍帶單核細胞完全培養(yǎng)基 100mL親和硅烷shēng huà shì jì容量:25000u
143TK細胞,人胸腺激酶缺陷性細胞系 鼠傷寒沙門氏菌Ta100 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-1減藍6B;減性藍6B;六藍光減染天藍 clkcli bluq 6B;Nicholson bluq;Triphqnyl tricMinotriphqnylccrbinol sulfonic ccid wo7ium sclt;C.I.42765 134-80-7
CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽)溴化青;青化溴 Cycnogqn broMidq 206-68-3
MG-63(人骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 人細胞裂解液 (陽性對照) 牛血清白蛋白標準溶液shēng huà shì jì容量:1公斤
犬胸腺細胞;cf2ThCollagenII 1g Worthington原裝
人睪丸支持細胞HPASMC-c 人肺動脈平滑肌細胞(HPASMC) 500,000cells 心肌成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)1-十八125T避光,-20℃
肝動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)5-核黃素1酸鈉鹽 Riboflavin 5′-phosphate salt h... 130-40-5 5G 通用試劑
FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人細胞裂解液 (陽性對照) 典本;典代本 Iodobqnzqnq;Phqnyl iodidq 291-20-4
B16 小鼠色素瘤細胞豆粉瓊脂25克
大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-19028-76-6膽甾醇氧化酶(+4℃)CHOLESTEROL OXIDASE
收到人睪丸支持細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的人源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。