概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

馬生殖泰勒氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f糖化血清蛋白（GSP）測(cè)定試劑盒（果糖胺法）（帶標(biāo)準(zhǔn)）  Physaminimin C  中文名：  分子式：C28H38O8 

糖化血清蛋白（GSP）測(cè)定試劑盒（果糖胺法）（帶標(biāo)準(zhǔn)）  Physaminimin C  1582259-03-7  中文名：  分子式：C28H38O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

糖化血紅蛋白（）測(cè)試盒   Glycosylated hemoglobin () test kit  4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine  145783-15-9  中文名：  分子式：C7H9Cl2N3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

碳酸氫   500g  4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester  188742-80-5  中文名：4,5-二咖啡?？鼘幩峒柞?/span>  分子式：C26H26O12  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  抗氧化; 莽草酸; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

肽酶抑制因子3   英文名稱：   Human Peptidase Inhibitor 3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PI-3  4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  35202-54-1  中文名：  分子式：C11H11NO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

Withaphysalin A  中文名：  分子式：C28H34O6  度：98.0%  兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Aspergillon A  中文名：  分子式：C22H32O  度：98.0%  兔內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Convallagenin B  中文名：鈴蘭皂苷元B  分子式：C27H44O6  度：97.5%  兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Glycoursodeoxycholic acid  中文名：甘氨熊脫氧膽酸  分子式：C26H43NO5  度：98.5%  兔心肌肌鈣蛋白Ⅰelisa試劑盒   兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒、兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Periplocin  中文名：杠柳毒苷  分子式：C36H56O13  度：98.5%  兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物elisa試劑盒   兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物試劑盒、兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Digalactosyldiacylglycerol  145033-48-3  中文名：雙半乳糖二酰甘油  分子式：C49H88O15 

小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T  Diethyl 2-acetamido-2-phenethylmalonate  中文名：  分子式：C17H23NO5 

小鼠壞死因子elisa試劑盒   小鼠壞死因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠壞死因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠壞死因子試劑盒、小鼠壞死因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Lidocaine hydrochloride  中文名：鹽酸利多卡因  分子式：C14H23ClN2O 

小鼠壞死因子-b(mouse TNF-b)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     DL-Alanyl-DL-Methionine  1999-43-5  中文名：DL-丙氨酰-DL-蛋氨酸  分子式：C8H16N2O3S 

小鼠壞死因子-a(mouse TNF-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  DL-Alanyl-DL-Methionine  1999-43-5  中文名：DL-丙氨酰-DL-蛋氨酸  分子式：C8H16N2O3S  度：99.0%  關(guān)鍵詞：

馬生殖泰勒氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸Ecdysterone 20,22-monoacetonide  22798-96-5  中文名：  分子式：C30H48O7  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  蛻皮甾; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠上腺素能a1A受體elisa試劑盒   小鼠上腺素能a1A受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠上腺素能a1A受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠上腺素能a1A受體試劑盒、小鼠上腺素能a1A受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Dyphylline  479-18-5  中文名：二羥丙茶堿  分子式：C10H14N4O4  度：98.0%      小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子elisa試劑盒   小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子試劑盒、小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Duloxetine hydrochloride  136434-34-9  中文名：鹽酸度洛西汀  分子式：C18H20ClNOS  度：98.0%      小鼠上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

D-Tryptophan methyl ester hydrochloride  14907-27-8  中文名：  分子式：C12H15ClN2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Drospirenone  67392-87-4  中文名：屈螺酮  分子式：C24H30O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠上腺素(E)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝