概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

帶絳蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒圖片1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f土壤酸性0酸酶（S-ACP）試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣  4-Aminoantipyrine  1983/7/8  中文名：4-氨基安替比林  分子式：C11H13N3O 

土壤漆酶測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣              4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺  分子式：C14H16N2O4S 

土壤脲酶（UE)測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣  4-Amino-3,5-dichloropyridine  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2  度：98.0%

土壤酶（S-CAT）測(cè)試盒   紫外分光光度法   50管/24樣  4-Amino-3-hydroxybenzoic acid  2374-03-0  中文名：4-氨基-3-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3 

土壤堿性蛋白酶   可見分光光度法   50管/24樣  4-Amino-3,5-dichloropyridine  22889-78-7  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

Polypodine B 20,22-acetonide  中文名：20,22-異丙叉基水龍骨甾酮B  分子式：C30H48O8  度：97.5%  兔血小板活化因子(rabbit PAF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Desglucohellebrin  中文名：  分子式：C30H42O10  度：98.0%  兔P-選擇素(rabbit P-selectin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Polypodine B  中文名：水龍骨甾酮B  分子式：C27H44O8  度：97.5%  兔血小板衍化生長(zhǎng)因子(rabbit PDGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

14β,16β-Dihydroxy-3β-(β-D-glucopyranosyloxy)-5α-bufa-20,22-dienolide  中文名：  分子式：C30H44O10  度：98.0%  兔趨化因子(rabbit Raes)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Withanolide S  中文名：醉茄內(nèi)酯S  分子式：C28H40O8  度：98.0%  兔血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝小鼠黃體生成素（LH）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dimethylolurea  中文名：雙羥甲脲  分子式：C3H8N2O3  度：98.0%

小鼠環(huán)氧化酶-2 (mouse COX-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzoin  中文名：安息香  分子式：C14H12O2  度：98.0%

小鼠環(huán)孢素Aelisa試劑盒   小鼠環(huán)孢素A試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠環(huán)孢素A試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠環(huán)孢素A試劑盒、小鼠環(huán)孢素Aeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Dihydroisotanshinone II  中文名：  分子式：C18H14O3  度：98.0%

小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Dimethylolurea  140-95-4  中文名：雙羥甲脲  分子式：C3H8N2O3 

小鼠環(huán)孢素A(CsA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Dihydroisotanshinone I  中文名：  分子式：C18H14O3  度：98.0%

帶絳蟲通用探針法熒光定量PCR試劑盒圖片Emtricitabine  143491-57-0  中文名：恩曲他濱  分子式：C8H10FN3O3S    人Apelin36elisa試劑盒   人Apelin 36試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人Apelin 36試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人Apelin 36試劑盒、人Apelin 36 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Dasatinib  302962-49-8  中文名：達(dá)沙替尼  分子式：C22H26ClN7O2S    雞白介素4elisa試劑盒   雞白介素4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   雞白介素4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：雞白介素4試劑盒、雞白介素4 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Zolpidem  82626-48-0  中文名：坦  分子式：C19H21N3O    小鼠泰澤病原體elisa試劑盒   小鼠泰澤病原體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠泰澤病原體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠泰澤病原體試劑盒、小鼠泰澤病原體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Repaglinide ethyl ester  147770-06-7  中文名：  分子式：C29H40N2O4    人著絲粒蛋白B(CENPB)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human CENPB (Cenomere Protein B) ELISA Kit

3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid  99469-99-5  中文名：  分子式：C13H16O5    人中心體蛋白110(CEP110)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human CEP110 (Cenosomal Protein 110kDa) ELISA Kit