概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實(shí)現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：

日本血吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f兔子促上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Thevetin B  27127-79-3  中文名：  分子式：C42H66O18 

兔子促甲狀腺素elisa試劑盒   兔子促甲狀腺素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子促甲狀腺素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子促甲狀腺素試劑盒、兔子促甲狀腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  36450-02-9  中文名：6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  菜豆; 櫟木; 接骨木屬; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子促甲狀腺素elisa試劑盒   兔子促甲狀腺素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子促甲狀腺素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子促甲狀腺素試劑盒、兔子促甲狀腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  6-O-Methylcerevisterol  126060-09-1  中文名：  分子式：C29H48O3  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  靈芝; 麥角甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-O-Feruloylglucose  137887-25-3  中文名：6-O-阿魏酰葡萄糖  分子式：C16H20O9  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

兔子促甲狀腺素(TSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose  202337-44-8  中文名：6-O-對羥基苯甲酰葡萄糖  分子式：C13H16O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

Carvedilol  中文名：卡維地洛  分子式：C24H26N2O4  度：98.0%  金黃地鼠壞死因子α   英文名稱：   Golden hamster Tumor Necrosis Factor α   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TNFα

5-Aminosalicylic acid  中文名：5-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%  豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Norfloxacin  中文名：諾氟沙星  分子式：C16H18FN3O3  度：98.0%  豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ElisaKit   ELISA.   96T/48T

Indapamide  中文名：吲達(dá)帕胺  分子式：C16H16ClN3O3S  度：98.0%  中文名稱   方法   規(guī)格

Loperamide hydrochloride  中文名：鹽酸洛哌丁胺  分子式：C29H34Cl2N2O2  度：98.0%  豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T小鼠腦脊髓炎病毒（TMEV）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ficaprenol 11  中文名：  分子式：C55H90O 

小鼠腦紅蛋白elisa試劑盒   小鼠腦紅蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠腦紅蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠腦紅蛋白試劑盒、小鼠腦紅蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Fingolimod hydrochloride  中文名：鹽酸芬戈莫德  分子式：C19H34ClNO2 

小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ficaprenol 11  26296-50-4  中文名：  分子式：C55H90O  度：%  關(guān)鍵詞：  中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Tetraethyl ranelate  58194-26-6  中文名：  分子式：C20H26N2O8S 

小鼠腦啡肽（ENK）ELISA試劑盒   96T   試劑盒   組裝/原裝           Ficaprenol 11  26296-50-4  中文名：  分子式：C55H90O

日本血吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Glaucogenin C mono-D-thevetoside  849201-84-9  中文名：  分子式：C28H40O9    兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

17α-Estradiol  57-91-0  中文名：17α-雌二醇  分子式：C18H24O2    Human signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 人信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA試劑盒

Stauntosaponin A  1417887-91-2  中文名：  分子式：C28H38O7    Humanai-Qfeveraibody,ai-Q-AbELISAKit 人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Ergosta-7,22-dien-3-one  32507-77-0  中文名：麥角甾-7,22-二烯-3-酮  分子式：C28H44O    HumanEndomeiumAibody,EMAbELISA試劑盒人抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Estradiol  50-28-2  中文名：雌二醇  分子式：C18H24O2    組織PKA激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次