概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實驗方法步驟：

蒙得維的沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒圖片方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結(jié)果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒、兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-28-8  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S  度：98.0%   

兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  8-Azaguanine  中文名：8-氮雜鳥嘌呤  分子式：C4H4N6O  度：98.0%

兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-(4-Fluorobenzyl)-2-chlorobenzimidazole  中文名：  分子式：C14H10ClFN2  度：98.0%

兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1elisa試劑盒   兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒、兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  7α-Hydroxysitosterol  中文名：7α-羥基谷甾醇  分子式：C29H50O2  度：95.0%

兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1elisa試劑盒   兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1試劑盒、兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  7-Oxo-β-sitosterol  中文名：7-氧代-β-谷甾醇  分子式：C29H48O2  度：98.0%

Cyclopropyl 2-fluorobenzyl ketone  中文名：  分子式：C11H11FO  度：98.0%  微量DNA凝膠回收試劑盒   50T

4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine hydrochloride  中文名：  分子式：C7H10ClNS  度：98.0%  MiniELGelExactionKit   100T

5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one hydrochloride  中文名：  分子式：C7H10ClNOS  度：98.0%  微量樣品DNA提取試劑盒   50T

Pidotimod  中文名：匹多莫德  分子式：C9H12N2O4S  度：98.0%  MiniEleDNAKit   100T              

Dicyclanil  中文名：地昔尼爾  分子式：C8H10N6  度：98.0%  微晶纖維素   50g小鼠前列腺特異性抗原elisa試劑盒   小鼠前列腺特異性抗原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠前列腺特異性抗原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠前列腺特異性抗原試劑盒、小鼠前列腺特異性抗原elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Ginsenoyne K  中文名：  分子式：C17H24O3  度：%

小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Gliclazide  21187-98-4  中文名：格列齊特  分子式：C15H21N3O3S 

小鼠前列腺酸性0酸酶elisa試劑盒   小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠前列腺酸性0酸酶試劑盒、小鼠前列腺酸性0酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Bisdemethoxycucurmin  24939-16-0  中文名：雙去甲氧基姜黃素  分子式：C19H16O4 

小鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              L-Aspartic acid  56-84-8  中文名：L-天門冬氨酸  分子式：C4H7NO4 

小鼠前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Gimeracil  中文名：吉莫斯特  分子式：C5H4ClNO2  度：98.0%

蒙得維的沙門氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒圖片Human cardioophin 1 (CT-1) ELISA Kit 人心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒  1,2,3,6-Tetra-O-galloyl-β-D-glucose  79886-50-3  中文名：1,2,3,6-四-O-沒食子酰-β-D-葡萄糖  分子式：C34H28O22 

Human cardiac specific oponin T (c) ELISA Kit 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒  1,2,3-Triacetyl-5-deoxy-D-ribose  中文名：  分子式：C11H16O7 

Human cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒  1,2-Bis(3-indenyl)ethane  中文名：1,2-雙(3-茚基)乙烷  分子式：C20H18 

Human cardiac myosin light chain 1 (CMLC-1) ELISA Kit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒  1,2-Benzisothiazolin-3-one  2634-33-5  中文名：1,2-苯并異噻唑-3-酮  分子式：C7H5NOS 

Human cardiac anscription factor GATA4 ELISA Kit 人心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4 ELISA試劑盒  1-(4-Fluorobenzyl)-2-chlorobenzimidazole  中文名：  分子式：C14H10ClFN2