PCR實驗方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結(jié)果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標準：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa試劑盒   兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白試劑盒、兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  9-Anthracenylmethyl acrylate  31645-34-8  中文名：丙烯酸-9-蒽甲酯  分子式：C18H14O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  9-Anthracenecarboxylic acid  723-62-6  中文名：9-蒽甲酸  分子式：C15H10O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  15,16-Dihydroxyoctadeca-9Z,12Z-dienoic acid  中文名：  分子式：C18H32O4  度：%

兔子上腺髓質(zhì)素elisa試劑盒   兔子上腺髓質(zhì)素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子上腺髓質(zhì)素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：兔子上腺髓質(zhì)素試劑盒、兔子上腺髓質(zhì)素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Benzoyl-L-histidine  中文名：苯甲?；?/span>-L-組氨酸  分子式：C13H13N3O3  度：98.0%

兔子上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  9-Aminominocycline hydrochloride  149934-21-4  中文名：  分子式：C23H29ClN4O7  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

Butenafine hydrochloride  中文名：鹽酸布替萘芬  分子式：C23H28ClN  度：98.0%  細胞色素 C(Cytochrome C)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Tegafur  中文名：替加氟  分子式：C8H9FN2O3  度：98.0%  CXC 趨化因子受體 1(CXCR1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Sorafenib tosylate  中文名：索拉非尼  分子式：C28H24ClF3N4O6S  度：98.0%  CXCR3(CXCR-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Sorafenib  中文名：索拉非尼  分子式：C21H16ClF3N4O3  度：98.0%  人 CXCL-11(I-TAC)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  

Loxoprofen  中文名：洛索洛芬  分子式：C15H18O3  度：98.0%  細胞角片段 CyK18(TPS)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝小鼠神經(jīng)膠質(zhì)細胞衍化營養(yǎng)因子(mouse GDNF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Benzyl 2-aminoacetate p-toluenesulfonate  1738-76-7  中文名：  分子式：C16H19NO5S 

小鼠神經(jīng)降壓肽（）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ikshusterol 3-O-glucoside  中文名：  分子式：C35H60O7  度：%

小鼠神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ikshusterol 3-O-glucoside  中文名：  分子式：C35H60O7 

小鼠神經(jīng)激肽A(NKA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Ikshusterol 3-O-glucoside  112137-81-2  中文名：  分子式：C35H60O7  度：%  關(guān)鍵詞：  異株蕁麻; 豆甾烷; 甾苷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體elisa試劑盒   小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體試劑盒、小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Loroglossin  中文名：  分子式：C34H46O18

鴨疫里默氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒圖片Humanai-Monocyteaibody,AMAELISAKit 人抗單核細胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  15,16-Dihydroxyoctadeca-9Z,12Z-dienoic acid  140129-22-2  中文名：  分子式：C18H32O4  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

HumanAi-mitochondriaaoaibodies,AMAELISAKit 人抗線粒體抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  1-Methyl-5-nitro-1H-benzimidazole-2-butanoic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C14H17N3O4  度：98.0%

Humanai-Mi2-aibodyELISAKit 人抗Mi2抗體(ai-Mi2-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  1-(2-Chloroacetyl)pyrrolidine-2-carbonitrile  中文名：  分子式：C7H9ClN2O  度：98.0%

Humanai-Ku-aibodyELISAKit 人抗Ku抗體(ai-Ku-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  1-(4-Fluorobenzyl)-2-chlorobenzimidazole  84946-20-3  中文名：  分子式：C14H10ClFN2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

HumanAi-keratinaibody,AKAELISAKit 人抗角蛋白抗體(AKA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  2-(Chloromethyl)-4-methylquinazoline  中文名：  分子式：C10H9ClN2  度：98.0%

注意事項：

鴨疫里默氏桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒圖片1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。