概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè)?。通過(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

桔青霉探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶(hù)的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷(xiāo)產(chǎn)品產(chǎn)品：

f小鼠apelin12(AP12)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzimidazole  51-17-2  中文名：苯并咪唑  分子式：C7H6N2 

小鼠apelin12(AP12)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Erythritol  149-32-6  中文名：赤蘚糖醇  分子式：C4H10O4 

小鼠Active Caspase-8   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Cleroindicin D  中文名：  分子式：C8H12O4 

小鼠Active Caspase-7   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Cleroindicin D  中文名：  分子式：C8H12O4  度：97.0%

小鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Cleroindicin E  165197-71-7  中文名：  分子式：C8H14O3

(R)-(-)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone  中文名：(R)-(-)-4-芐基-3-丙酰基-2-惡唑烷酮  分子式：C13H15NO3  度：98.0%  小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子   英文名稱(chēng)：   Mouse Connective Tissue Growth Factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   CTGF

N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  中文名：N-苯甲?；?/span>-L-酪氨酸乙酯  分子式：C18H19NO4  度：98.0%  小鼠皮質(zhì)   英文名稱(chēng)：   Mouse Coicosterone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   CO

O-Benzyl-L-serine  中文名：O-芐基-L-絲氨酸  分子式：C10H13NO3  度：98.0%  小鼠肌酐   英文名稱(chēng)：   Mouse Creatinine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   CT

S-Benzyl-L-cysteine  中文名：S-芐基-L-半胱氨酸  分子式：C10H13NO2S  度：98.0%  小鼠補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Benzoyl-DL-valine  中文名：苯甲酰-DL-纈氨酸  分子式：C12H15NO3  度：98.0%  小鼠脫氫酶E1(PDHE1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝小鼠乙酰輔酶A羧化酶   英文名稱(chēng)：   Mouse Acetyl Coenzyme A Carboxylase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   ACC  Dexamethasone 21-phosphate disodium salt  2392-39-4  中文名：地塞米松磷酸鈉  分子式：C22H30FO8P  度：98.0%   

小鼠乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（CHAT）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           N4-Benzoylcytidine  13089-48-0  中文名：N4-苯甲酰胞苷  分子式：C16H17N3O6 

小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  N1-Methyl-4-nitrobenzene-1,2-diamine  中文名：  分子式：C7H9N3O2  度：98.0%

小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Clopidogrel bisulfate  中文名：硫酸氫氯吡格雷  分子式：C16H18ClNO6S2  度：98.0%

小鼠乙酰膽堿elisa試劑盒   小鼠乙酰膽堿試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠乙酰膽堿試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠乙酰膽堿試劑盒、小鼠乙酰膽堿elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Cynatratoside A  97399-96-7  中文名：白薇苷A  分子式：C28H40O8

桔青霉探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸Loxoprofen  中文名：洛索洛芬  分子式：C15H18O3    豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Losartan  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O    豬可溶性?xún)?nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Loroglossin  中文名：  分子式：C34H46O18    豬雌激素(E)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Loratadine  中文名：氯雷他定  分子式：C22H23ClN2O2    豬雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Loperamide hydrochloride  中文名：鹽酸洛哌丁胺  分子式：C29H34Cl2N2O2    豬雌二醇(E2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝