概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：

波氏奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒圖片1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f小鼠αL巖藻糖苷酶elisa試劑盒   小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠αL巖藻糖苷酶試劑盒、小鼠αL巖藻糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Bis(4-bromophenyl)acetylene  中文名：二(4-溴苯基)乙炔  分子式：C14H8Br2  度：98.0%

小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane  中文名：雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來酰亞胺基苯基)甲烷  分子式：C27H26N2O4  度：98.0%

小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Doxapram hydrochloride monohydrate  中文名：鹽酸多沙普侖  分子式：C24H33ClN2O3 

小鼠αL艾杜糖苷酸酶elisa試劑盒   小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠αL艾杜糖苷酸酶試劑盒、小鼠αL艾杜糖苷酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Bis(4-bromophenyl)acetylene  中文名：二(4-溴苯基)乙炔  分子式：C14H8Br2 

小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Bis(3-ethyl-5-methyl-4-maleimidophenyl)methane  中文名：雙(3-乙基-5-甲基-4-馬來酰亞胺基苯基)甲烷  分子式：C27H26N2O4

Neutral berberine sulfate  中文名：硫酸黃連素  分子式：C20H20NO8S  度：98.0%  小鼠凋亡相關(guān)因子elisa試劑盒   小鼠凋亡相關(guān)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠凋亡相關(guān)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠凋亡相關(guān)因子試劑盒、小鼠凋亡相關(guān)因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Pefloxacin mesylate  中文名：甲磺酸培氟沙星  分子式：C18H24FN3O6S  度：98.0%  小鼠第八因子相關(guān)抗原elisa試劑盒   小鼠第八因子相關(guān)抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠第八因子相關(guān)抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠第八因子相關(guān)抗原試劑盒、小鼠第八因子相關(guān)抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Ethopabate  中文名：乙氧酰胺苯甲酯  分子式：C12H15NO4  度：99.0%  小鼠促卵泡素elisa試劑盒   小鼠促卵泡素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠促卵泡素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠促卵泡素試劑盒、小鼠促卵泡素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Nicarbazin  中文名：尼卡巴嗪  分子式：C19H18N6O6  度：99.0%  小鼠促甲狀腺素釋放激素elisa試劑盒   小鼠促甲狀腺素釋放激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠促甲狀腺素釋放激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠促甲狀腺素釋放激素試劑盒、小鼠促甲狀腺素釋放激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Ketoprofen  中文名：酮基布洛芬  分子式：C16H14O3  度：99.0%  小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝小鼠組胺(mouse Histamine)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Neochlorogenic acid  中文名：新綠原酸  分子式：C16H18O9  度：98.0%

小鼠組胺(mouse HIS)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Creoside III  中文名：  分子式：C18H24O9  度：98.0%

小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Nefopam hydrochloride  中文名：鹽酸奈福泮  分子式：C17H20ClNO  度：98.0%

小鼠組胺(HIS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              N-(2-Methyl-5-nitrophenyl)-4- (pyridin-3-yl)pyrimidin-2-amine  152460-09-8  中文名：  分子式：C16H13N5O2 

小鼠組胺   英文名稱：   Histamine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HIS  Mepivacaine  96-88-8  中文名：甲哌卡因  分子式：C15H22N2O

波氏奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒圖片Methyl 1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-2-ethoxy-1H-benzimidazole-7-carboxylate  中文名：  分子式：C25H21N3O3    豬白細(xì)胞間介素10   英文名稱：   Porcine Ierleukin 10   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-10

Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate  中文名：  分子式：C19H34O3    豬白細(xì)胞間介素1β   英文名稱：   Porcine Ierleukin 1β   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-1β

Methyl (3R)-3-(tert-butyldimethylsilyloxy)-5-oxo-6-triphenylphosphoranylidenehexanoate  中文名：  分子式：C31H39O4PSi    豬白細(xì)胞間介素 1   英文名稱：   Porcine Ierleukin 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-1

Methoxydienone  中文名：沃氏物  分子式：C20H28O2    豬白細(xì)胞間介素2   英文名稱：   Porcine Ierleukin 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-2

Methenolone enanthate  中文名：美替諾龍庚酸酯  分子式：C27H42O3    豬白細(xì)胞間介素8   英文名稱：   Porcine Ierleukin 8   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-8