概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè)?。通過(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

野牛奧斯特線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷(xiāo)產(chǎn)品產(chǎn)品：

f小鼠β-防御素elisa試劑盒   小鼠β-防御素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠β-防御素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β-防御素試劑盒、小鼠β-防御素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Benzoin  119-53-9  中文名：安息香  分子式：C14H12O2 

小鼠β-防御素(β-DF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl] sulfone  27205-03-4  中文名：雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]砜  分子式：C16H18O6S  度：98.0%   

小鼠β淀粉樣蛋白elisa試劑盒   小鼠β淀粉樣蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠β淀粉樣蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β淀粉樣蛋白試劑盒、小鼠β淀粉樣蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Enrofloxacin  中文名：恩諾沙星  分子式：C19H22FN3O3 

小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Cryptotanshinone  中文名：隱丹參酮  分子式：C19H20O3  度：98.0%

小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Bis(phenylacetyl) disulfide  15088-78-5  中文名：雙(苯乙酰)二硫化物  分子式：C16H14O2S2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

Tiamulin  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S  度：98.0%  小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Sulfadiazine  中文名：磺胺嘧啶  分子式：C10H10N4O2S  度：99.0%  小鼠氧化酶elisa試劑盒   小鼠氧化酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠氧化酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠氧化酶試劑盒、小鼠氧化酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Rifampicin  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12  度：96.5%  小鼠對(duì)基苯elisa試劑盒   小鼠對(duì)基苯試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠對(duì)基苯試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠對(duì)基苯試劑盒、小鼠對(duì)基苯eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Dyphylline  中文名：二羥丙茶堿  分子式：C10H14N4O4  度：98.0%  小鼠蛋酸酶elisa試劑盒   小鼠蛋酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠蛋酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠蛋酸酶試劑盒、小鼠蛋酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Sulfamethazine  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S  度：99.0%  小鼠交聯(lián)物elisa試劑盒   小鼠交聯(lián)物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠交聯(lián)物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠交聯(lián)物試劑盒、小鼠交聯(lián)物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA3   英文名稱：   cardiac muscle anscription factor GATA3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   GATA3  Androstenediol-3-acetate  1639-43-6  中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯  分子式：C21H32O3 

心肌轉(zhuǎn)錄因子 4(GATA4)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Nitrendipine  中文名：尼群地平  分子式：C18H20N2O6  度：98.0%

心肌營(yíng)養(yǎng)素1   英文名稱：   Cardioophin-1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   CT-1  Nifuroxazide  中文名：硝呋酚  分子式：C12H9N3O5  度：98.0%

心肌營(yíng)養(yǎng)素 -1(CT-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Antipyrine  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O  度：99.0%

心肌肌鈣蛋白1   英文名稱：   cardiac oponin 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   CTn1  Nifedipine  中文名：硝苯地平  分子式：C17H18N2O6  度：98.0%

野牛奧斯特線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate  中文名：  分子式：C22H19N3O2  度：98.0%  小鼠8異前列腺素elisa試劑盒   小鼠8異前列腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠8異前列腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠8異前列腺素試劑盒、小鼠8異前列腺素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-dieno[17,16-d]oxazole-3,20-dione  中文名：  分子式：C23H29NO4  度：98.0%  小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷elisa試劑盒   小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷試劑盒、小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Deflazacort  中文名：地夫可特  分子式：C25H31NO6  度：98.0%  小鼠6前列腺素elisa試劑盒   小鼠6前列腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠6前列腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠6前列腺素試劑盒、小鼠6前列腺素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Cortisone acetate  中文名：醋酸可的松  分子式：C23H30O6  度：98.0%  小鼠8-羥基脫氧8-OHdG鳥(niǎo)苷酸(mouse 8-OHdG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Hydroxyprogesterone  中文名：羥孕酮  分子式：C21H30O3  度：98.0%  小鼠食欲素A(mouse Orexin A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝