概述：

皮諾卡菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè)?。通過(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Capecitabine-2',3'-cyclic carbonate  921769-65-5  中文名：卡培他濱  分子式：C16H20FN3O7 

小鼠白介素1α(IL-1α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Bathophenanthroline  1662-01-7  中文名：紅菲繞啉  分子式：C24H16N2 

小鼠白介素-1α   英文名稱：    ierleukin-1α   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-1α  Benzyl 2-aminoacetate p-toluenesulfonate  中文名：  分子式：C16H19NO5S 

小鼠白介素-1b(mouse IL-1b)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Benzyl 4-bromophenyl ketone  中文名：芐基4-溴代苯基酮  分子式：C14H11BrO 

小鼠白介素-1a(mouse IL-1a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzyl 4-bromophenyl ketone  中文名：芐基4-溴代苯基酮  分子式：C14H11BrO  度：98.0%

11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-dieno[17,16-d]oxazole-3,20-dione  13649-88-2  中文名：  分子式：C23H29NO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione  6870-94-6  中文名：  分子式：C22H30O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠骨成型蛋白7   英文名稱：   Mouse Bone Morphogenetic Protein 7   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BMP7

11α-Hydroxycanrenone  192569-17-8  中文名：  分子式：C22H28O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠B細(xì)胞刺激因子   英文名稱：   B lymphocyte stimulator   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BAFF

11α-Hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione  564-33-0  中文名：11α-羥基-雄甾-4-烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠凋亡因子BAX   英文名稱：   apoptogen BAX   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BAX

11-Hydroxyjasmonic acid  140447-14-9  中文名：  分子式：C12H18O4  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因BCL-2   英文名稱：   Cell appoptosis inhibitory BCL-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BCL-2血栓素A2   英文名稱：   Human Thromboxane A2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TXA2  Pefloxacin mesylate  中文名：甲磺酸培氟沙星  分子式：C18H24FN3O6S  度：98.0%

血栓前體蛋白   英文名稱：   thrombus precursor protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TpP  Pazufloxacin mesilate  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S  度：98.0%

血清總鐵結(jié)合能力測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣              p-Anisil  1226-42-2  中文名：茴香偶酰  分子式：C16H14O4 

血清總膽固醇（TC）含量測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣              Atorvastatin calcium  中文名：阿托伐他汀鈣  分子式：C33H35FN2O5 

血清游離膽固醇（FC）含量測(cè)定試劑盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣  Pazopanib  中文名：帕唑帕尼  分子式：C21H23N7O2S  度：98.0%

皮諾卡菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒說(shuō)明書Myricadenin A  1612239-23-2  中文名：  分子式：C39H40O17  度：97.5%  關(guān)鍵詞：    小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Mumeose K  2132384-01-9  中文名：  分子式：C25H32O15  度：93.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Monobenzone  103-16-2  中文名：莫諾苯宗  分子式：C13H12O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠細(xì)胞凋亡因子 (mouse Fas)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D

Momor-cerebroside I  606125-07-9  中文名：  分子式：C48H93NO10  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  神經(jīng)酰胺; 腦苷脂; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠細(xì)胞凋亡因子配體 (mouse Fas-Ligand)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D

m-Nitrohydrocinnamic acid  1664-57-9  中文名：  分子式：C9H9NO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    mouse Flt3 Ligand   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D