概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè)?。通過(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

微黃細(xì)頸線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Cerebroside D  113773-89-0  中文名：腦苷脂D  分子式：C43H81NO9  度：96.5%  關(guān)鍵詞：  激發(fā)子活性; 細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑; 子實(shí)體形成促進(jìn)劑; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Cerebroside B  88642-46-0  中文名：腦苷酯B  分子式：C41H77NO9  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  誘導(dǎo)活性; 細(xì)胞分化誘導(dǎo)劑; 子實(shí)體形成增強(qiáng)劑; 抗真菌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠白三烯   英文名稱：   Mouse leukoiene   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   LT3  Gynuramide II  295803-03-1  中文名：  分子式：C42H83NO5 

小鼠白介素elisa試劑盒   小鼠白介素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠白介素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠白介素試劑盒、小鼠白介素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Ceftiofur hydrochloride  103980-44-5  中文名：頭孢噻呋鹽酸鹽  分子式：C19H18ClN5O7S3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠白介素-9(mouse IL-9)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Cefcapene pivoxil hydrochloride  中文名：鹽酸頭孢卡品酯  分子式：C23H32ClN5O9S2

2-(4-Chloro-3-hydroxy-1-butynyl)-5-(1,3-pentadiynyl)thiophene  26905-70-4  中文名：  分子式：C13H9ClOS  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠漢坦病毒（HV）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-(3-Methoxypropyl)-4-oxo-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-41-0  中文名：  分子式：C10H14N2O6S3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠過(guò)氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate  340702-68-3  中文名：  分子式：C50H93NO9  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  神經(jīng)酰胺; 腦苷脂; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2-(2'-Hydroxytetracosanoylamino)-octadecane-1,3,4-triol  154801-30-6  中文名：  分子式：C42H85NO5  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠過(guò)敏/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-(2-Aminothiazole-4-yl)-2-methoxyiminoacetic acid  65872-41-5  中文名：氨噻肟酸  分子式：C6H7N3O3S  度：98.0%      小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Perospirone hydrochloride  中文名：鹽酸哌羅匹隆  分子式：C23H31ClN4O2S 

鴨脂肪酸合成酶（FAS）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Phenytoin  中文名：苯妥英  分子式：C15H12N2O2  度：98.0%

鴨脂肪甘油三酯酯酶（ATGL）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Phenytoin  中文名：苯妥英  分子式：C15H12N2O2 

鴨胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Phenytoin  57-41-0  中文名：苯妥英  分子式：C15H12N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

鴨瘟病毒(DPV)核酸檢測(cè)試劑盒   48T  Phenformin hydrochloride  中文名：鹽酸苯乙雙胍  分子式：C10H16ClN5  度：98.0%

微黃細(xì)頸線蟲(chóng)探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸N,N-dimethyl-2-Quinoxalinamine  中文名：  分子式：C10H11N3  度：98.0%  兔子瘦素(LEP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

2-Hydroxyquinoxaline  中文名：  分子式：C8H6N2O  度：98.0%  兔子視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝         

Sulfaquinoxaline  中文名：磺胺喹噁啉  分子式：C14H12N4O2S  度：98.0%  兔子髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Metamizole sodium  中文名：安乃近  分子式：C13H16N3NaO4S  度：98.0%  兔子視黃醇結(jié)合蛋白4elisa試劑盒   兔子視黃醇結(jié)合蛋白4試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子視黃醇結(jié)合蛋白4試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子視黃醇結(jié)合蛋白4試劑盒、兔子視黃醇結(jié)合蛋白4eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Valsartan  中文名：纈沙坦  分子式：C24H29N5O3  度：99.0%  兔子透明質(zhì)酸elisa試劑盒   兔子透明質(zhì)酸試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子透明質(zhì)酸試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子透明質(zhì)酸試劑盒、兔子透明質(zhì)酸eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。