概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實(shí)現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：

山羊分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

fCandesartan ethyl ester  中文名：  分子式：C26H24N6O3  度：98.0%  小鼠P物質(zhì)elisa試劑盒   小鼠P物質(zhì)試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠P物質(zhì)試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠P物質(zhì)試劑盒、小鼠P物質(zhì)eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  中文名：  分子式：C8H10N2O3S  度：98.0%  小鼠p53elisa試劑盒   小鼠p53試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠p53試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠p53試劑盒、小鼠p53eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Candesartan methyl ester  中文名：  分子式：C25H22N6O3  度：98.0%  小鼠N端前腦素elisa試劑盒   小鼠N端前腦素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠N端前腦素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠N端前腦素試劑盒、小鼠N端前腦素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Ethyl 2-ethoxy-1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-1H-benzimidazole-7-carboxylate  中文名：  分子式：C26H23N3O3  度：98.0%  小鼠L選擇素elisa試劑盒   小鼠L選擇素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠L選擇素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠L選擇素試劑盒、小鼠L選擇素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Ethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate  中文名：  分子式：C23H19N3O4  度：98.0%  小鼠P物質(zhì)   英文名稱：   Substance P   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Substance P

豚鼠壞死因子αelisa試劑盒   豚鼠壞死因子α試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豚鼠壞死因子α試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豚鼠壞死因子α試劑盒、豚鼠壞死因子αeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Amorolfine  中文名：阿莫羅芬  分子式：C21H36ClNO  度：98.0%

豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Amlodipine besylate  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S 

豚鼠壞死因子α(TNF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              alpha-Terthienylmethanol  中文名：  分子式：C13H10OS3 

豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Aloin  中文名：蘆薈苷  分子式：C21H22O9 

豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Aminophylline  317-34-0  中文名：氨茶堿  分子式：C16H24N10O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Nandrolone  中文名：諾龍  分子式：C18H26O2  度：98.0%

小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Convallatoxin  中文名：鈴蘭毒苷  分子式：C29H42O10 

小鼠孕受體elisa試劑盒   小鼠孕受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠孕受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠孕受體試劑盒、小鼠孕受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Naftopidil dihydrochloride  中文名：鹽酸萘哌地爾  分子式：C24H30Cl2N2O3  度：98.0%

小鼠孕受體(PROGR)ELISAkit   ELISA.   96T/48T  Naftifine hydrochloride  中文名：鹽酸萘替芬  分子式：C21H22ClN  度：98.0%

小鼠孕激素elisa試劑盒   小鼠孕激素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠孕激素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠孕激素試劑盒、小鼠孕激素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Naftopidil dihydrochloride  中文名：鹽酸萘哌地爾  分子式：C24H30Cl2N2O3

山羊分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Marsdenoside F  中文名：  分子式：C39H60O14    豬腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Mannitol  中文名：甘露醇  分子式：C6H14O6    豬補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Mannioside A  中文名：  分子式：C39H62O13    豬補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

m-Anisic acid  中文名：間茴香酸  分子式：C8H8O3    豬補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Manidipine dihydrochloride  中文名：鹽酸馬尼地平  分子式：C35H40Cl2N4O6    豬腸三葉因子elisa試劑盒   豬腸三葉因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬腸三葉因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬腸三葉因子試劑盒、豬腸三葉因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。