概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實驗方法步驟：

住白細胞原蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結(jié)果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f2-Amino-2'-nitrodiphenyl sulfide  中文名：2-氨基-2'-硝基二苯基硫醚  分子式：C12H10N2O2S  度：98.0%  小鼠促上腺皮質(zhì)激素(mouse ACTH)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

Tranexamic acid  中文名：凝血酸  分子式：C8H15NO2  度：98.0%  小鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

2-Aminonicotinic acid  中文名：2-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%  小鼠Active Caspase-7   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝

6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone  中文名：6'-氨基-3',4'-(亞甲基二氧代)苯乙酮  分子式：C9H9NO3  度：98.0%  小鼠Active Caspase-8   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  

2-Amino-3-methylbenzoic acid  中文名：2-氨基-3-甲基苯甲酸  分子式：C8H9NO2  度：98.0%  小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin）   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝  Lafutidine  118288-08-7  中文名：拉呋替丁  分子式：C22H29N3O4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠E選擇素elisa試劑盒   小鼠E選擇素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠E選擇素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠E選擇素試劑盒、小鼠E選擇素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Bezafibrate  41859-67-0  中文名：苯扎貝特  分子式：C19H20ClNO4 

小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzoyl-DL-methionine  中文名：苯甲?；?/span>-DL-蛋氨酸  分子式：C12H15NO3S  度：98.0%

小鼠E鈣粘著蛋白elisa試劑盒   小鼠E鈣粘著蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠E鈣粘著蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠E鈣粘著蛋白試劑盒、小鼠E鈣粘著蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Betaxolol hydrochloride  中文名：鹽酸倍他洛爾  分子式：C18H30ClNO3  度：98.0%

小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Benzoyl-DL-methionine  中文名：苯甲?；?/span>-DL-蛋氨酸  分子式：C12H15NO3S乙型肝炎病毒e抗原   英文名稱：   Human Hepatitis B e Aigen   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   HBeAg  n-Tritriacontan-16,18-dione  24514-86-1  中文名：  分子式：C33H64O2 

乙酰輔酶A羧化酶測試盒   可見分光光度法   50管/24樣  Propranolol hydrochloride  中文名：鹽酸普萘洛爾  分子式：C16H22ClNO2  度：98.0%

乙酰丁香   100mg  Propafenone hydrochloride  中文名：鹽酸普羅帕酮  分子式：C21H28ClNO3  度：98.0%

乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（ChAT）檢測   Detection of the ache of the choline  Prilocaine hydrochloride  中文名：鹽酸丙胺卡因  分子式：C13H21ClN2O 

乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（ChAT）測定試劑盒（測組織）（紫外比色法）  Propacetamol hydrochloride  中文名：鹽酸丙帕他莫  分子式：C14H21ClN2O3

住白細胞原蟲屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒說明書Nandrolone decanoate  360-70-3  中文名：癸酸諾龍  分子式：C28H44O3    人轉(zhuǎn)錄激活因子6(ATF6)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human ATF6 (Activating anscription Factor 6) ELISA Kit

Testosterone acetate  1045-69-8  中文名：醋酸睪酮  分子式：C21H30O3    人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G1(ABCG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human ABCG1 (ATP Binding Cassette anspoer G1) ELISA Kit

Testosterone isocaproate  15262-86-9  中文名：異己酸睪酮  分子式：C25H38O3    人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ABCA1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human ABCA1(ATP Binding Cassette anspoer A1) ELISA Kit              

Testosterone decanoate  5721-91-5  中文名：癸酸睪酮  分子式：C29H46O3    人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白試劑盒、人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Dehydroepiandrosterone acetate  853-23-6  中文名：醋酸去氫表雄酮  分子式：C21H30O3    人轉(zhuǎn)化生長因子β2elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子β2試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子β2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。