概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實(shí)現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

熱帶利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒廠家方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f3,3-Dimethoxy-5α-androstan-17-one  中文名：3,3-二甲氧基-5α-雄烷-17-酮  分子式：C21H34O3  度：98.0%  小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17β-ol  中文名：3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇  分子式：C21H32O2  度：93.0%  小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

17-Ethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-one  中文名：17-亞乙二氧基-雄-1,4-二烯-3-酮  分子式：C21H28O3  度：95.0%  小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3β-Acetoxy-5α-androstan-17β-ol  中文名：3-乙?；?/span>-5α-雄烷二醇  分子式：C21H34O3  度：98.0%  小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  中文名：17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮  分子式：C26H30O3  度：98.0%  小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠MCP-3(mouse MCP-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Clemastine fumarate  中文名：富馬酸氯馬斯汀  分子式：C25H30ClNO5 

小鼠L選擇素elisa試劑盒   小鼠L選擇素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠L選擇素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠L選擇素試劑盒、小鼠L選擇素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     Benzyl L-(+)-mandelate  中文名：L-(+)-扁桃酸芐酯  分子式：C15H14O3 

小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzyl carbazate  5331-43-1  中文名：肼基甲酸芐酯  分子式：C8H10N2O2  度：98.0%   

小鼠L苯解酶(PAL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzyl carbazate  5331-43-1  中文名：肼基甲酸芐酯  分子式：C8H10N2O2 

小鼠KN-62ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzyl carbamate  中文名：氨基甲酸芐酯  分子式：C8H9NO2  度：98.0%余快速測試盒   Rapid test kit of residual  α-Spinasterol glucoside  中文名：α-菠甾醇葡萄糖苷  分子式：C35H58O6  度：97.0%

誘導(dǎo)型合酶 (iNOS)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  α-Spinasterone  中文名：  分子式：C29H46O  度：%

誘導(dǎo)型合酶   英文名稱：   induced niic oxide syhas   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   iNOS  Wallicoside  88797-59-5  中文名：斷節(jié)參苷  分子式：C61H98O26 

游離脂肪酸含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣  α-Tocopherolquinone  中文名：  分子式：C29H50O3  度：98.0%

游離脂肪酸（NEFA）檢測   Total iron binding (TIBC) detection  β-Anhydrouzarigenin  中文名：  分子式：C23H32O3  度：97.0%

熱帶利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒廠家N-Benzoyl-leucine  中文名：N-苯甲?；?/span>-亮氨酸  分子式：3    β-木糖苷酶測試盒   可見分光光度法   50管/24樣           

N-Benzoyl-(2R,3S)-3-phenylisoserine  中文名：  分子式：C16H15NO4    豬(HYD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Naproxen  中文名：萘普生  分子式：C14H14O3    豬(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Nandrolone undecylate  中文名：十一酸諾龍  分子式：C29H46O3    豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Nandrolone laurate  中文名：月桂酸諾龍  分子式：C30H48O3    豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T