概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過(guò)程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化來(lái)對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè)?。通過(guò)對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

杜氏利什曼蟲(chóng)(黑熱病病原蟲(chóng))探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶(hù)的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷(xiāo)產(chǎn)品產(chǎn)品：

fCabozantinib  中文名：卡博替尼  分子式：C28H24FN3O5  度：98.0%  小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Afatinib  中文名：阿法替尼  分子式：C24H25ClFN5O3  度：98.0%  小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

9-Hydroxy-4-androstene-3,17-dione  中文名：9-羥基-4-雄甾烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3  度：98.0%  小鼠蛋白激酶A   英文名稱(chēng)：   Mouse Protein Kinase A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   PKA

7-Amino-4-methylcoumarin  中文名：7-氨基-4-甲基香豆素  分子式：C10H9NO2  度：98.0%  小鼠降鈣素原   英文名稱(chēng)：   Mouse procalcitonin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   PCT

Indometacin  中文名：吲哚美辛  分子式：C19H16ClNO4  度：98.0%  小鼠血小板活化因子   英文名稱(chēng)：   platelet active factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   PAF

小鼠P選擇素elisa試劑盒   小鼠P選擇素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠P選擇素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠P選擇素試劑盒、小鼠P選擇素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Betamipron  3440-28-6  中文名：倍他米隆  分子式：C10H11NO3  度：98.0%   

小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Tetracycline  60-54-8  中文名：四環(huán)素  分子式：C22H24N2O8 

小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Betamethasone  378-44-9  中文名：倍他米松  分子式：C22H29FO5  度：98.0%   

小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Boldenone acetate  中文名：寶丹酮醋酸酯  分子式：C21H28O3  度：98.0%

小鼠P物質(zhì)elisa試劑盒   小鼠P物質(zhì)試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠P物質(zhì)試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠P物質(zhì)試劑盒、小鼠P物質(zhì)eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Benzyl nicotinate  94-44-0  中文名：煙酸芐酯  分子式：C13H11NO2  度：98.0%魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇elisa試劑盒   魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇試劑盒、魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Valdecoxib  181695-72-7  中文名：帕瑞考昔  分子式：C16H14N2O3S 

魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Zolpidem  中文名：坦  分子式：C19H21N3O 

魚(yú)類(lèi)皮質(zhì)醇(Coisol)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  α-D-Glucose  492-62-6  中文名：α-D-葡萄糖  分子式：C6H12O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

魚(yú)類(lèi)甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Zolpidem  82626-48-0  中文名：坦  分子式：C19H21N3O  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

魚(yú)類(lèi)促性腺激素釋放激素elisa試劑盒   魚(yú)類(lèi)促性腺激素釋放激素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   魚(yú)類(lèi)促性腺激素釋放激素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：魚(yú)類(lèi)促性腺激素釋放激素試劑盒、魚(yú)類(lèi)促性腺激素釋放激素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Zopiclone  中文名：佐匹克隆  分子式：C17H17ClN6O3  度：98.0%

杜氏利什曼蟲(chóng)(黑熱病病原蟲(chóng))探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒運(yùn)輸n-Butyl β-D-fructofuranoside  中文名：正丁基-β-D-呋喃果糖苷  分子式：C10H20O6    神經(jīng)激肽 A(Neurokinin A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

N-Boc-O-Benzyl-D-serine  中文名：N-Boc-O-芐基-D-絲氨酸  分子式：C15H21NO5    中心粒細(xì)胞彈性蛋白酶 (Neuophil elastase)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

N-Benzylmaleimide  中文名：N-芐基馬來(lái)酰亞胺  分子式：C11H9NO2    中性木聚糖酶測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/24樣

N-Benzoyl-L-tyrosine ethyl ester  中文名：N-苯甲?；?/span>-L-酪氨酸乙酯  分子式：C18H19NO4    酸性木聚糖酶測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/24樣

N-Benzoyl-L-glutamic acid  中文名：N-苯甲酰-L-谷氨酸  分子式：C12H13NO5    堿性木聚糖酶測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/24樣