概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實驗方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：

牛皮蠅蛆探針法熒光定量PCR試劑盒圖片1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實驗，進(jìn)行實驗結(jié)果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f1,6,2',6'-O-Tetraacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose  138195-49-0  中文名：  分子式：C29H36O17  度：95.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠骨成型蛋白-4   英文名稱：   Bone morphogenetic protein-4   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BMP-4

1,6,2',3',6'-O-Pentaacetyl-3-O-trans-p-coumaroylsucrose  138213-63-5  中文名：  分子式：C31H38O18  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠骨成型蛋白受體1A   英文名稱：   Bone morphogenetic protein-Receptor 1A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   BMP-R1A

1,5-Pentanediol diacrylate  36840-85-4  中文名：  分子式：C11H16O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠細(xì)胞表面抗原分子CD4+   英文名稱：   Mouse Cluster of Differeiation 4+   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CD4+

1,5,15-Tri-O-methylmorindol  942609-65-6  中文名：  分子式：C18H16O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  海巴戟; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠骨保護(hù)素配體(mouse OPGL)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene  3073-87-8  中文名：1,4-二[2-(4-甲基-5-苯基惡唑基)]苯  分子式：C26H20N2O2  度：%  關(guān)鍵詞：    小鼠血小板活化因子(mouse PAF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠白介素-17   英文名稱：    ierleukin-17   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IL-17  Capecitabine  154361-50-9  中文名：卡培他濱  分子式：C15H22FN3O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞 

小鼠白介素16(IL-16)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Canrenone  976-71-6  中文名：坎利酮  分子式：C22H28O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠白介素-15(mouse IL-15)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Candesartan cilexetil  中文名：坎地沙坦西來替昔酯  分子式：C33H34N6O6  度：98.0%

小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Candesartan methyl ester  139481-69-9  中文名：  分子式：C25H22N6O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠白介素-13(mouse IL-13)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Candesartan ethyl ester  139481-58-6  中文名：  分子式：C26H24N6O3植物總酚測試盒   可見分光光度法   50管/24樣  Tropisetron hydrochloride  中文名：鹽酸托烷司瓊  分子式：C17H21ClN2O2 

植物總RNA提取試劑盒   Pla total RNA Exaction Kit                 Riligustilide  89354-45-0  中文名：  分子式：C24H28O4 

植物蔗糖含量試劑盒   可見分光光度法    50管/48樣  Trehalose  中文名：海藻糖  分子式：C12H22O11  度：98.0%

植物原測試盒   可見分光光度法   50管/24樣  Tropisetron hydrochloride  105826-92-4  中文名：鹽酸托烷司瓊  分子式：C17H21ClN2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

植物玉米素核苷(ZR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Testosterone acetate  1045-69-8  中文名：醋酸睪酮  分子式：C21H30O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

牛皮蠅蛆探針法熒光定量PCR試劑盒圖片Ophiopogonin D  中文名：麥冬皂苷D  分子式：C44H70O16  度：%  兔子白介素2elisa試劑盒   兔子白介素2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子白介素2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子白介素2試劑盒、兔子白介素2elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

β-Sitosterol  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O  度：98.0%  人α2巨球蛋白elisa試劑盒   人α2巨球蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人α2巨球蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人α2巨球蛋白試劑盒、人α2巨球蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Thevetin B  中文名：  分子式：C42H66O18  度：97.5%  兔內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

6,7-Dihydroneridienone A  中文名：  分子式：C21H28O3  度：%  兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Dregeoside A11  中文名：  分子式：C55H88O22  度：%  兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T