概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實驗方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

馬皮疽組織胞漿菌探針法熒光定量PCR試劑盒運輸簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結(jié)果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標(biāo)準(zhǔn)。

注意事項：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride  4568-71-2  中文名：3-芐基-5-(2-羥乙基)-4-甲基氯化噻唑鎓  分子式：C13H16ClNOS  度：98.0%      小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

3-Benzoylthiazolidine-2-thione  70326-37-3  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2  度：98.0%      小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

3-Benzalphthalide  575-61-1  中文名：3-亞芐基苯酞  分子式：C15H10O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠膠原酶Ⅲ(CollagenaseⅢ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

3-Aminopiperidine dihydrochloride  334618-23-4  中文名：  分子式：C5H14Cl2N2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠降鈣素原(PCT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

3-Aminoadamantan-1-ol  702-82-9  中文名：  分子式：C10H17NO  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠降鈣素受體(C)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Crenulatin  63026-02-8  中文名：大花紅天素  分子式：C11H20O6  度：98.5%  關(guān)鍵詞：  抗真菌; 抑制細胞凋亡; 促進生長; 阿魏; 半萜類; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Coumarin 7  27425-55-4  中文名：香豆素 7  分子式：C20H19N3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠蛋白激酶A   英文名稱：   Mouse Protein Kinase A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PKA  Coumarin 6  38215-36-0  中文名：香豆素 6  分子式：C20H18N2O2S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠彈性蛋白   英文名稱：   Mouse Elastin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ELN  Nandrolone laurate  中文名：月桂酸諾龍  分子式：C30H48O3 

小鼠膽囊收縮素elisa試劑盒   小鼠膽囊收縮素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠膽囊收縮素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠膽囊收縮素試劑盒、小鼠膽囊收縮素eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Colelomycerone A  中文名：  分子式：C17H18O6  度：98.0%豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子elisa試劑盒   豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子試劑盒、豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Sulfaclozine  中文名：磺胺氯吡嗪  分子式：C10H9ClN4O2S 

豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Sulfamethazine  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S 

豬黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Taxilluside A  1661914-46-0  中文名：  分子式：C18H24O10  度：97.5%  關(guān)鍵詞： 

豬核轉(zhuǎn)錄因子kb-p65(NF-kBp65)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Sulfamethazine  57-68-1  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S  度：99.0%   

豬核因子κB抑制蛋白α（IKB-α）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Sulfamethazine  57-68-1  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S

馬皮疽組織胞漿菌探針法熒光定量PCR試劑盒運輸Pioglitazone hydrochloride  112529-15-4  中文名：鹽酸吡格列酮  分子式：C19H21ClN2O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠內(nèi)皮細胞生長因子D   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor D   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   VEGF-D

Pilosol A  501086-15-3  中文名：  分子式：C13H12O  度：%  關(guān)鍵詞：    小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體1   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor receptor 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   VEGF-R1

Pidotimod  121808-62-6  中文名：匹多莫德  分子式：C9H12N2O4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠內(nèi)皮生長因子受體 -1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

Physapruin A  155178-03-3  中文名：  分子式：C28H38O7  度：96.5%  關(guān)鍵詞：  毒性; 酸漿屬; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠內(nèi)皮生長因子受體 2(mouse VEGF-R2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國 R&D

Physaminimin C  1582259-03-7  中文名：  分子式：C28H38O8  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    大鼠Active Caspase-3   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝