概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測(cè)。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測(cè), 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

內(nèi)阿米巴通用探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測(cè)細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L(zhǎng)基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

fPerforatumone  827319-50-6  中文名：  分子式：C35H52O5  度：%  關(guān)鍵詞：  植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠心素   英文名稱：   aialnaiureticpeptide   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ANP

Pentoxyverine citrate  23142-01-0  中文名：枸櫞酸噴托維林  分子式：C26H39NO10  度：98.0%      小鼠凋亡誘導(dǎo)因子   英文名稱：   apoptosis-inducing factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   AIF

Pentagalloylglucose  14937-32-7  中文名：五沒食子酰葡萄糖  分子式：C41H32O26  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Pemetrexed disodium  357166-30-4  中文名：培美曲塞二鈉  分子式：C21H23N5Na2O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Pemetrexed  137281-23-3  中文名：培美曲塞二鈉  分子式：C20H21N5O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠甲狀腺素(T4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠上腺素能a1A受體elisa試劑盒   小鼠上腺素能a1A受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠上腺素能a1A受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠上腺素能a1A受體試劑盒、小鼠上腺素能a1A受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Hydroxyprogesterone acetate  302-23-8  中文名：醋酸羥孕酮  分子式：C23H32O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Hydroxyprogesterone  中文名：羥孕酮  分子式：C21H30O3 

小鼠上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  N-6-Methyl-7,7-dioxo-2-sulfamoyl-5,6-dihydro-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-yl]acetamide  147200-03-1  中文名：  分子式：C10H14N2O5S3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠上腺素elisa試劑盒   小鼠上腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠上腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠上腺素試劑盒、小鼠上腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Hydroxyprogesterone acetate  中文名：醋酸羥孕酮  分子式：C23H32O4 

小鼠上腺素(EPI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Bis(carboxymethyl) trithiocarbonate  6326-83-6  中文名：雙(羧甲基)三硫代碳酸鹽  分子式：C5H6O4S3Loroglossin  58139-22-3  中文名：  分子式：C34H46O18    Rat bradykinin (BK) ELISA Kit 大鼠舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒

6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose  202337-44-8  中文名：6-O-對(duì)羥基苯甲酰葡萄糖  分子式：C13H16O8    HumanAi-ypsin,ATELISAKit 人抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Cerebroside D  113773-89-0  中文名：腦苷脂D  分子式：C43H81NO9    Humandecay-acceleratingfactor,DAFELISA試劑盒人降解加速因子(DAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Ethyl chlorogenate  425408-42-0  中文名：綠原酸乙酯  分子式：C18H22O9    組織IRAK4激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Tenuifoliside A  139726-35-5  中文名：遠(yuǎn)志蔗糖酯A  分子式：C31H38O17    Humanplasmin/fibrinolysin,PL/FbnELISAKit人纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

內(nèi)阿米巴通用探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸Tolazoline hydrochloride  中文名：鹽酸妥拉唑林  分子式：C10H13ClN2  度：98.0%  兔子細(xì)胞間粘附分子2elisa試劑盒   兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子細(xì)胞間粘附分子2試劑盒、兔子細(xì)胞間粘附分子2eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Meclizine hydrochloride  中文名：鹽酸美克洛嗪  分子式：C25H29Cl3N2  度：98.0%  兔子細(xì)胞間粘附分子1elisa試劑盒   兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子細(xì)胞間粘附分子1試劑盒、兔子細(xì)胞間粘附分子1eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one  中文名：  分子式：C11H7ClN4O2  度：98.0%  兔子脫氧酚elisa試劑盒   兔子脫氧酚試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子脫氧酚試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子脫氧酚試劑盒、兔子脫氧酚eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Zopiclone  中文名：佐匹克隆  分子式：C17H17ClN6O3  度：98.0%  豬氧化酶elisa試劑盒   豬氧化酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   豬氧化酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬氧化酶試劑盒、豬氧化酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Capecitabine 2',3'-diacetate  中文名：  分子式：C19H26FN3O8  度：98.0%  兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T