概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產物不斷積累，熒光信號也會相應的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實驗方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：

1．基礎程序；

2．擴增溫度和延伸溫度；

3．反應時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應液的配制；

6．PCR技術的基本原理；

7．PCR的反應動力學；

8．PCR擴增產物；

9．PCR反應體系與反應條件。點擊了解更公司產品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務：

革蜱探針法熒光定量PCR試劑盒運輸簡介：實時熒光定量PCR技術于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術服務，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉錄成cDNA。

（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標準：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準。

以下是公司正在熱銷產品產品：

fTerbinafine hydrochloride  78628-80-5  中文名：鹽酸特比萘芬  分子式：C21H26ClN  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Terbinafine  91161-71-6  中文名：特比萘芬  分子式：C21H25N  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠乙酰膽堿轉移酶（CHAT）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Tenuifoliside A  139726-35-5  中文名：遠志蔗糖酯A  分子式：C31H38O17  度：95.0%  關鍵詞：  抗抑郁; 遠志; 蔗糖; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Tenofovir  147127-20-6  中文名：泰諾福韋  分子式：C9H14N5O4P  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Tenacissoside I  191729-44-9  中文名：通關藤苷I  分子式：C44H62O14  度：%  關鍵詞：  通關藤; 孕甾烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠維生素D結合蛋白   英文名稱：   Mouse Vitamin D Binding protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DBP  Lynestrenol  中文名：利奈孕醇  分子式：C20H28O  度：98.0%

小鼠維生素D3(VD3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Lurasidone  中文名：魯拉西酮  分子式：C28H36N4O2S  度：98.0%

小鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Lurasidone  中文名：魯拉西酮  分子式：C28H36N4O2S 

小鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Lurasidone  367514-87-2  中文名：魯拉西酮  分子式：C28H36N4O2S  度：98.0%  關鍵詞： 

小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Lurasidone  367514-87-2  中文名：魯拉西酮  分子式：C28H36N4O2S

Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt  153012-37-4  中文名：  分子式：C28H42N6O8S2    Aigen of human non small cell lung cancer (LTA) ELISA Kit 人非小細胞肺癌抗原(LTA)ELISA試劑盒

Cefcapene pivoxil hydrochloride  147816-24-8  中文名：鹽酸頭孢卡品酯  分子式：C23H32ClN5O9S2    rabbitEsadiol,E2ELISAKit 兔子雌二醇(E2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Baclofen  1134-47-0  中文名：巴氯芬  分子式：C10H12ClNO2    CLIAKitforBeta2-GP1AbIgM(HumanBeta2-Glycoprotein1AibodyIgM)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgM規(guī)格：48T/96T

1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethanone  58113-30-7  中文名：  分子式：C12H15ClO3    細菌營養(yǎng)肉湯500毫升

Nifuroxazide  965-52-6  中文名：硝呋酚  分子式：C12H9N3O5    rabbitEndothelin1,ET-1ELISAKit兔子內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

革蜱探針法熒光定量PCR試劑盒運輸Zolpidem  82626-48-0  中文名：坦  分子式：C19H21N3O  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠卵泡休止素   英文名稱：   Mouse Follistatin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FST

Zolmitriptan  139264-17-8  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠叉頭框蛋白O3   英文名稱：   Mouse Forkhead Box protein O3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   FOXO3

Zileuton  111406-87-2  中文名：齊留通  分子式：C11H12N2O2S  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠脂肪甘油三酯酯酶（ATGL）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Zidovudine  30516-87-1  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠脂多糖（LPS）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Xanthorin  17526-15-7  中文名：  分子式：C16H12O6  度：%  關鍵詞：  抗菌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝