概述：

白喉棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒廠家熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實(shí)現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f12-Aminolauric acid  中文名：12-氨基十二酸  分子式：C12H25NO2    半胱天冬蛋白酶-3   英文名稱：   cysteine-aspaic acid protease-3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Caspase-3

11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-dieno[17,16-d]oxazole-3,20-dione  中文名：  分子式：C23H29NO4    心肌肌鈣蛋白1   英文名稱：   cardiac oponin 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CTn1

11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione  中文名：  分子式：C22H30O4    Ⅰ型膠原C端肽   英文名稱：   C-telopeptide of type Ⅰ collagen   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CTX-Ⅰ

11α-Hydroxycanrenone  中文名：  分子式：C22H28O4    細(xì)胞色素C   英文名稱：   Cytochrome C   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Cytochrome C

11α-Hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione  中文名：11α-羥基-雄甾-4-烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3    CXC趨化因子受體1   英文名稱：   CXC chemokine receptor 1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CXCR1

小鼠舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Methylprednisolone hemisuccinate  2921-57-5  中文名：  分子式：C26H34O8 

小鼠舒緩激肽(BK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Doxapram hydrochloride monohydrate  7081-53-0  中文名：鹽酸多沙普侖  分子式：C24H33ClN2O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠生成素樣蛋白4   英文名稱：   Mouse Angiopoietin Like Protein 4   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ANGPTL4  D-Pinitol  10284-63-6  中文名：D-松醇  分子式：C7H14O6 

小鼠生成素樣蛋白2   英文名稱：   Mouse Angiopoietin like protein 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ANGPTL2  D-Pinitol  10284-63-6  中文名：D-松醇  分子式：C7H14O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  降糖; 棉鈴蟲幼蟲生長抑制劑; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methyl levulinate  中文名：  分子式：  度：%

Dabigatran etexilate benzenesulfonate  1019206-65-5  中文名：苯磺酸達(dá)比加群酯  分子式：C40H47N7O8S    人脂蛋白脂酶elisa試劑盒   人脂蛋白脂酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂蛋白脂酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋白脂酶試劑盒、人脂蛋白脂酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  41263-74-5  中文名：  分子式：C8H8N2O4    人脂蛋脂酶A2elisa試劑盒   人脂蛋脂酶A2試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂蛋脂酶A2試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋脂酶A2試劑盒、人脂蛋脂酶A2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  

Tiagabine hydrochloride  145821-59-6  中文名：鹽酸噻加賓  分子式：C20H26ClNO2S2    人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Felodipine  72509-76-3  中文名：非洛地平  分子式：C18H19Cl2NO4    中文名稱   方法   規(guī)格

Ranolazine dihydrochloride  95635-56-6  中文名：鹽酸雷諾嗪  分子式：C24H35Cl2N3O4    人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

白喉棒桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒廠家蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒（測血清、組織）（紫外比色法）  Avanafil  330784-47-9  中文名：阿伐那非  分子式：C23H26ClN7O3 

蛋白質(zhì)羰基測試盒   紫外分光光度法   50管/24樣              Pirfenidone  53179-13-8  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO 

蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（總蛋白、白蛋白）   Protein standard (total protein, albumin)  Retigabine  150812-12-7  中文名：瑞替加濱  分子式：C16H18FN3O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

蛋白標(biāo)準(zhǔn)(5mg/mlBSA)   1ml  3-Amino-2-naphthoic acid  中文名：3-氨基-2-萘甲酸  分子式：C11H9NO2  度：98.0%

膽堿酯酶（CHE）測定試劑盒（比色法）                    Androst-5-en-3-ol-7,17-dione acetate  中文名：7-酮基去氫表雄酮醋酸酯  分子式：C21H28O4