概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)也會(huì)相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對(duì)PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時(shí)的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對(duì)DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實(shí)現(xiàn)基因的相對(duì)定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒廠家方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時(shí)間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請(qǐng)您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請(qǐng)?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f2-Amino-6-chlorobenzothiazole  中文名：2-氨基-6-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S    內(nèi)皮細(xì)胞合酶 (eNOS)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

2-Amino-5-nitrothiazole  中文名：2-氨基-5-硝基噻唑  分子式：C3H3N3O2S    內(nèi)皮生長因子受體2   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor receptor 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   VEGF-R2

2-Amino-5-nitrobenzophenone  中文名：2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式：C13H10N2O3    內(nèi)皮生長因子受體3   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor receptor 3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   VEGF-R3

2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  中文名：2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑  分子式：C2H3N3S2    活性腸肽   英文名稱：   vasoactine inestinal peptide   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   VIP

2-Amino-5-chlorobenzophenone  中文名：2-氨基-5-氯二苯甲酮  分子式：C13H10ClNO    內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素   英文名稱：   Visfatin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Visfatin

小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  N,N'-Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine  152120-54-2  中文名：N,N'-二叔丁氧羰基-1H-吡唑-1-甲脒  分子式：C14H22N4O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Manidipine dihydrochloride  89226-75-5  中文名：鹽酸馬尼地平  分子式：C35H40Cl2N4O6 

小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           N,N'-Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine  152120-54-2  中文名：N,N'-二叔丁氧羰基-1H-吡唑-1-甲脒  分子式：C14H22N4O4 

小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide  中文名：N,N'-雙(2-羥乙基)草酰胺  分子式：C6H12N2O4  度：98.0%

小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              N6-Benzoyladenine  4005-49-6  中文名：N6-苯甲?；汆堰?/span>  分子式：C12H9N5O

Boldenone undecylenate  13103-34-9  中文名：寶丹酮十一烯酸酯  分子式：C30H44O3    人轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子β1試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子β1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

2-(5-Chloro-2-phenoxyphenyl)acetic acid  70958-20-2  中文名：  分子式：C14H11ClO3    人轉(zhuǎn)化生長因子αelisa試劑盒   人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人轉(zhuǎn)化生長因子α試劑盒、人轉(zhuǎn)化生長因子α elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Trimethoprim  738-70-5  中文名：甲氧芐啶  分子式：C14H18N4O3    人轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGF-β2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human TGF-β2 (ansforming Growth Factor β2) ELISA Kit

Amoxicillin  26787-78-0  中文名：阿莫西林  分子式：C16H19N3O5S    人血小板生成素(TPO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human TPO (Thrombopoietin) ELISA Kit

Cefixime  79350-37-1  中文名：頭孢克肟  分子式：C16H15N5O7S2    人血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human TSP-1 (Thrombospondin-1) ELISA Kit

產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌通用探針法熒光定量PCR試劑盒廠家化鈣   100g  Androstenone hydrazone  中文名：雄酮腙  分子式：C19H30N2O  度：98.0%

化銨   100g  Pregabalin  148553-50-8  中文名：普瑞巴林  分子式：C8H17NO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

猴載脂蛋白B100elisa試劑盒   猴載脂蛋白B100試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   猴載脂蛋白B100試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：猴載脂蛋白B100試劑盒、猴載脂蛋白B100elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  6'-Amino-3',4'-(methylenedioxy)acetophenone  28657-75-2  中文名：6'-氨基-3',4'-(亞甲基二氧代)苯乙酮  分子式：C9H9NO3 

猴載脂蛋白A1elisa試劑盒   猴載脂蛋白A1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   猴載脂蛋白A1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：猴載脂蛋白A1試劑盒、猴載脂蛋白A1elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  6-Amino-1-methyluracil  中文名：  分子式：C5H7N3O2  度：98.0%

猴胰島素elisa試劑盒   猴胰島素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   猴胰島素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：猴胰島素試劑盒、猴胰島素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     6-Amino-1-methyluracil  中文名：  分子式：C5H7N3O2