發(fā)根土壤桿菌使用說明書產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

其他編號(hào)：ACCC 10060

菌種名稱：發(fā)根土壤桿菌使用說明書

拉丁文名：Agrobacterium rhizogenes  

培養(yǎng)溫度：25-37℃，詳見說明書

用途：研究、教學(xué)用菌

發(fā)根土壤桿菌使用說明書產(chǎn)品圖片：

從xuanya所購菌種如果為冷凍干燥安瓿，建議采用下列方法恢復(fù)培養(yǎng)，供參考。

一、安瓿管開啟

用浸過75％酒精的脫脂棉球檫凈安瓿管表面。

用酒精燈火焰將安瓿管頂端加熱。

將冷的無菌水滴至加熱的安瓿管頂端使玻璃裂開。

用無菌的鑷子敲開安瓿管頂端。

二、菌種恢復(fù)培養(yǎng)

1.用無菌吸管加0.3ml無菌水于安瓿管內(nèi)，使凍干菌種塊溶化呈懸浮狀。

2.用無菌吸管取0.1ml懸浮液于己制備好的適宜該菌生長(zhǎng)的斜面培養(yǎng)基上，涂勻，在適宜的溫度下培養(yǎng)。

三、注意事項(xiàng)

1.全部操作過程需在無菌條件下進(jìn)行。

2.每支安瓿的菌懸液最多只能接3-4支斜面，避免接種量太少不利于菌種生長(zhǎng)。有些菌種經(jīng)冷凍干燥后，需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)。

3.要求在厭氧條件下培養(yǎng)的菌種，自開封后的全過程，均需按厭氧菌培養(yǎng)條件的要求處理。

4.此安瓿管一次性使用完。

發(fā)根土壤桿菌使用說明書長(zhǎng)期保藏對(duì)真菌培養(yǎng)特征的影響：

  對(duì)于用于分類研究的模式菌、教學(xué)研究、專利菌株保藏以及作為環(huán)境參考菌株來說，保持真菌培養(yǎng)特征的穩(wěn)定性是非常必要的。低溫保藏一般認(rèn)為可以速率，但Tian和Bertolini報(bào)道了Botrytis allii 和 Penicillium hirsutum 在低溫保藏下孢子萌發(fā)時(shí)間提前和萌發(fā)管延伸速度加快[5]。Wing等發(fā)現(xiàn)Fusarium compactum 和 Fusarium acuminatum菌株經(jīng)過連續(xù)10次的單孢和菌絲生長(zhǎng)*分離后，菌株發(fā)生退化[6]。Kim觀察到了Fusarium oxysporumf.sp.niveeum 菌株經(jīng)過保藏后菌絲變細(xì)、變薄，經(jīng)過18次的連續(xù)傳代培養(yǎng)后，發(fā)生“角變”，菌落形態(tài)發(fā)生變化以及不再產(chǎn)生色素，且“角變”的性狀在以后的傳代培養(yǎng)中保持不變[7]。Pholiota nameko 菌株長(zhǎng)期保藏后用于接種生產(chǎn)后，產(chǎn)量下降，其原因是子實(shí)體形成滯后和數(shù)量下降，菌絲的生長(zhǎng)速度和漆酶的活性發(fā)生變化。目前雖然很少有文獻(xiàn)報(bào)道真菌在長(zhǎng)期保藏過程中引起的孢子大小、產(chǎn)孢特征等性狀的變異情況，而產(chǎn)孢能力下降，活性降低報(bào)道較多。Aparecido等對(duì)一些植物病原真菌長(zhǎng)期保藏后的活性、致病力、孢子萌發(fā)等指標(biāo)進(jìn)行了監(jiān)測(cè)[8]。Maria等[9]在比較蒸餾水和礦油保藏三年的保藏結(jié)果中，二株Aureobasidium pullulans 和一株Thamnidium elegans礦油保藏沒有檢測(cè)到活性，而蒸餾水保藏方法中Absidia glauca Alternari dianthicola Colletothrichum coccodes Fusarium fusarioides Gliocladium roseum等5個(gè)菌株沒有檢測(cè)到活性，同時(shí)發(fā)現(xiàn)保藏于礦油中的Aspergillus flavescens Colletotrichum coffeanum Fusarium culmorum Fusarium oxysporum Giliocladium roseum Verticillium lecanii各一個(gè)菌株喪失了產(chǎn)孢特性。

發(fā)根土壤桿菌使用說明書長(zhǎng)期保藏對(duì)真菌生理生化性狀的影響

 對(duì)于一些病原菌來說，真菌長(zhǎng)期保藏過程中*避免致病力的喪失成為*的難題，真菌長(zhǎng)期保藏過中，致病力下降的報(bào)道較多。Kelly 等發(fā)現(xiàn)Fusarium oxysporum f.sp. ciceris經(jīng)過六年的在PDA培養(yǎng)基上大量的轉(zhuǎn)接后在接種到鷹嘴豆上沒有致病力[10]。一些保藏在蒸餾水中的Phytothphora 菌株經(jīng)過長(zhǎng)期保藏后也喪失了致病性[11]。Ryan 和 Ellison [12] 用原位結(jié)合超低溫保藏的技術(shù)方法對(duì)Puccinia spegazzinii菌株進(jìn)行了保藏處理，經(jīng)過保藏后的菌株依然有產(chǎn)生擔(dān)孢子的能力，但對(duì)寄主侵染能力下降，在葉柄的侵染沒有成功。一些昆蟲和植物的病原菌如果不經(jīng)過回接到寄主昆蟲或植物，也會(huì)逐漸喪失其致病性。Mota等[13]驗(yàn)證了Arthrobotrys robusta和 Monacrosporium thaumasium菌株結(jié)合線蟲的不同保藏工藝處理對(duì)捕食線蟲能力的影響，發(fā)現(xiàn)添加保護(hù)劑可以提高Arthrobotrys robusta和Monacrosporium thaumasium菌株防治線蟲的能力。López Lastra等[14]對(duì)一些Hyphomycetes Entomophthorales Trichomycetes和 Oomycetes的9株內(nèi)生病原真菌進(jìn)行了18個(gè)月的長(zhǎng)期保藏的試驗(yàn)，并在第3、6、12、18個(gè)月分別監(jiān)測(cè)保藏菌株的活性及其侵染性，Paecilomyces fumosoroseus菌株蒸餾水、礦油、-20℃和-80℃保藏等幾種保藏方法都適合，Smittium culisetae 和 Leptolegnia chapmanii 菌株只適合于蒸餾水和礦油保藏。Tommerup用凍干法保藏VA真菌，并監(jiān)測(cè)了其孢子萌發(fā)能力、菌絲生長(zhǎng)能力以及定殖能力[15]。對(duì)于一些菌株的致病性等能力的喪失，可以用一些酶活和代謝產(chǎn)物的指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測(cè)[16]。Shinohara 等[17]發(fā)現(xiàn)，用于釀酒的Saccharomyces cerevisiae 菌株經(jīng)過多次的斜面轉(zhuǎn)接后，引起了酒品質(zhì)的變化。

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